酸枣仁汤抗焦虑作用神经-内分泌-免疫网络调节机制.pdf

中文摘要 中文摘要 焦虑症是目前发病率较高的身心疾病之一，现代医学认为本病的发生与个体 生物学特征和社会心理因素有关。西医主要应用药物干预的方法，但现有抗焦虑 药物存在易依赖、起效缓慢、药物间相互作用和不良反应等诸多缺陷。利用中医 方剂多成分共存、多靶点、多途径调节的特点，寻找中药抗焦虑新药具有可能。 但引入现代焦虑动物模型和药物效用评价技术，从实验角度揭示中医防治焦虑症 的现代内涵及其作用机制尚属空白。 本课题采用目前国际通用的焦虑动物模型和了解到的焦虑病理生理机制，以 中医防治焦虑症的经验以及立法组方思路为背景，选取经典方酸枣仁汤，在确认 其抗焦虑作用的基础上，筛选最佳有效剂量，同时探察高架+字迷官模型(EPM) 动物可能存在的内分泌、免疫状态，并从神经一内分泌一免疫网络的角度，在整体、 细胞、分子水平上探讨酸枣仁汤抗焦虑作用的可能机制。 论文分两部分。文献综述部分主要对酸枣仁汤临床与实验研究进行了总结， 对神经一内分泌一免疫网络及焦虑症的发病机制进行了综述。实验研究部分主要从 酸枣仁汤抗焦虑作用行为学的量效关系评价、焦虑模型动物内分泌、免疫功能状 态探察以及酸枣仁汤抗焦虑的神经一内分泌一免疫网络调节机制三个方面进行了 探讨。 实验研究一酸枣仁汤抗焦虑作用行为学的量效关系评价 方法：将大鼠随机分为模型、DZP、SZRTI、II、III、Iv共6组，每组15只。 给予SZRT灌胃，DZP组给予img／kg灌胃，模型组灌服等容积的生理盐水。各组 连续给药IOd，于第10d做行为测试，观察和比较各项行为学指标。结果：SZRT 在7。59／kg一159／kg剂量范围内，具有一定的抗焦虑效应，与DZP的作用方向一 可以显著增加OE+CE，提高大鼠在封闭臂的rear[ng值，显示出一定的镇静作用。 结论：中药SZRT在7．59／kg～1 59／kg剂量范围内确有抗焦虑效用，因其不影响 动物运动能力，故认为该效应可能与其镇静催眠作用无关：达到一定剂量后，SZRT 抗焦虑效应并不再伴随剂量的增加而增强，而呈现一定的镇静作用。SZRT这种小 剂量(7．59／kg一1 59／kg)抗焦虑、大剂量(309／kg)镇静的作用特点提示中药 复方可能存在不同给药剂量呈现不同临床效用的现象。 实验研究二焦虑模型动物内分泌、免疫功能状态探察 方法：用放赍．法分别观察和洲孛女器6鲴1小时阍占，PPM删；半岳日n南I々。 2 酸枣仁汤抗焦虑作用的神经一内分泌一免疫网络调节机制 6h，空白对照组和模型组)的血IL一2和ACTH水平变化。结果：经过EPM探究后 大鼠即刻血清IL-2水平出现明显升高，随后的3～6h显著下降，并呈现低于正 常水平的趋势；即刻至3h血浆ACTH无明显变化，6h开始ACTH升高显著。结论： EPM焦虑模型大鼠确有免疫、内分泌系统的改变，且其变化有一定的时程差异， EPN应用于药物抗焦虑效用机制的研究具有一定的可行性。 实验研究三酸枣仁汤抗焦虑的神经一内分泌一免疫网络调节机制 整体研究：1．对EPM大鼠神经递质和调质、免疫细胞因子、HPAA的影响 方法：用高效液相、放免、硝酸盐比色、镉还原法分别测定EPM大鼠海马、 脾、胸腺的单胺神经递质及其代谢产物含量、下丘脑和血浆p-EP、下丘脑CRF、 血浆ACTH和血清NO、IL一1p、IL一6、TNF o[、CORT水平。结果：与模型组相比， DZP、SZRT组大鼠海马组织NE含量均呈不同程度显著降低，DZP组降低更为明显； 平；SZRT可以明显升高EPM大鼠血清IL一1D、TNFa水平，但对IL-6含量无明 显影响；DZP并不能改变此焦虑模型大鼠的血清细胞因子水平；DZP、SZRT能明 显升高E?M大鼠血浆ACTH水平，但对于下丘脑CRF、血清CORTDZP、SZRT作用 不明显。结论：降低海马中NE的释放，降低5-HT功能、抑制海马中5-HT的合 成，降低血浆D-EP含量，提高血清No浓度可能是SZRT抗焦虑作用的重要环节， SZRT还可通过提高EPM大鼠血清IL一1p、TNFo【水平，增加垂体ACTH的合成或 分泌，调节焦虑状态下机体内分泌一免疫功能紊乱。 2．对EPM大鼠脑组织GABA．受体m