三种Bt基因（cry1Ac、cry2A和cry9C）抗虫水稻的培育及其评价.pdfVIP

中文摘要 水稻是主要粮食作物之一，全世界有超过20亿的人口以水稻为主食。虫害是造 成水稻减产的主要原因之一。在现代农业中，使用化学杀虫剂为减少虫害损失起到 了巨大作用。但是，化学杀虫剂的使用会不可避免的造成环境污染以及威胁人类健 康。 转基因抗虫作物是近些年兴起的一种新的害虫防治技术，它从1996年开始在世 界上大规模种植。这种转基因作物可以表达一种细菌Bacillus 源的杀虫蛋白。这种细菌作为一种生物杀虫剂在农业上已经使用了60多年了。Bt 作物在农业上的使用可以大幅度的减少杀虫剂的使用量，这不仅直接降低了种植者 的种植成本，而且对保护人类的健康和生态环境都有积极的意义。 cry9C*)分别转入优良的水稻恢复系明恢53中，并获得了一批抗虫性优良的转基因 家系。本研究获得的主要研究结果如下： 中正常表达，转基因植株表现出了良好的抗虫性。因此，这两个基因的人工改造 是成功的。 2．获得了11个外源基因单拷贝插入、抗虫性优良且农艺性状较好的纯合转基因明恢 Tgc．4和T9C-5)。这些转基因家系的选择标准为：高抗虫性，没有明显农艺性状 的改变，单拷贝插入和后代分离符合盂德尔遗传规律。这些抗性家系不仅可以用 来作为新的抗性育种资源，也可以用于发展双价Bt水稻。 3．通过室内的抗虫性生物检测，所有的Bt转基因水稻家系均表现出对两种主要的水 incertulas 稻钻蛀害虫三化螟(Tryporyzawalker)和二化螟(Ch／／o suppressalis walker)的高度抗性。结果显示，所有转基因家系可在5天内彻底杀死一龄三化 螟幼虫；彻底或者近似彻底地杀死一龄二化螟幼虫。 4．研究了二化螟幼虫对Bt水稻茎杆取食的选择性。结果表明，在同时喂饲Bt转基因 水稻茎杆和原品种明恢63茎杆时，二化螟幼虫可以辨识Bt茎杆和非Bt茎杆．在仅 倾向于取食Cry2A*的茎杆。 5．通过ELISA的检测方法对不同的Bt转基因水稻家系进行了蛋白含量的测定，结果 表明Cry9C+家系的蛋白表达量最高为0．37％一1．18％叶片总可溶蛋白，而Cry2A* 此外对同--Bt植株不同生长时期的Bt蛋白含量也进行了测定。结果显示，同一转 基因植株在不同时期Bt蛋白浓度会有一定程度的变化，一般在水稻植株的生长后 期，Bt蛋白浓度会有所下降。 同水稻组织的表达强度由高到低顺序为：叶片(灌浆期)未成熟种子a颖壳)． 根(灌浆期)茎杆(灌浆期)。此外，Ubiquitin启动子在成熟的种子及种壳中仍 有一定的表达强度。 7．2004年和2005年两年，在武汉两次对Bt明恢63家系进行了田问评估。两次的试验 结果均表明Bt转基因家系相对于原品种明恢63，抗虫性显著增强。 8．2005年在武汉，对Bt明恢63的一些主要的农艺性状进行了田间考察。结果表明， Bt转基因家系相对原品种明恢63，在农艺性状上有不同程度的变异，还需要进一 步回交恢复。 关键词：水稻农杆菌介导的遗传转化苏云金芽胞杆菌crylAccry2A* cry9C·高剂量庇护所策略基因聚合害虫抗性治理 害虫综合治理 II Abstract isone for two Rice ofthemost the foodover billion importantcrops，andstaple intheworld．Insectisonethe causeof people damage major yield have contributedto lossescausedthe in pesticidessignificantly decreasingyield