第节基因工程及其应用(公开课课件).pptVIP

基因工程 2、基因工程与药物研制 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 　　许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。 　　微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。 　　胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 　　将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素！使其价格降低了30%-50%! * * * * 培育抗虫棉的简要过程： （一）基因工程的概念 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 什么叫基因工程？ 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的性状。 （一）基因工程的概念 （一）基因工程的概念 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三： 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ （二）基因操作的工具 基因的“剪刀”——限制性内切酶 基因的“针线”——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 基因的“剪刀”—限制性内切酶（限制酶） （二）基因操作的工具 存在：主要是微生物体内 特点：特异性 即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。 （二）基因操作的工具 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 基因的“剪刀”—限制性内切酶（限制酶） （二）基因操作的工具 限制酶 基因的“剪刀”—限制性内切酶（限制酶） 什么叫黏性末端？ （二）基因操作的工具 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 （二）基因操作的工具 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，如果让两者的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子。 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？ （二）基因操作的工具 导入过程需要运输工具——基因的运载体。 运载体的作用有哪些？ 作用：作为运载工具，将外源基因转移到受体细胞中去。 作为运载体必须具备哪些条件？ （二）基因操作的工具 1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2）具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3）具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗生素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 基因的运载工具——运载体： （二）基因操作的工具 常用的运载体主要有两类： 1）质粒 2）噬菌体或某些动、植物病毒 （二）基因操作的工具 质粒是基因工程最常用的运载体。 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中核区以外的DNA分子。 绝大多数细菌质粒都是很小的环状DNA分子。 大肠杆菌的质粒： （二）基因操作的工具 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，常含有抗药基因。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 目的基因片段 质粒DNA片段 重组DNA分子 基因的针线——DNA连接酶 （二）基因操作的工具 DNA连接酶可把脱氧核糖和磷酸交替连接而成的DNA骨架上的缺口“缝合”起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 四个基本步骤： （三）基因操作的基本步骤 1）提取目的基因 2）目的基因与运载体结合 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测和表达 （三）基因操作的基本步骤 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 步骤一：目的基因的提取