蛋白质工程概述(上课用).pptVIP

背景知识：用于治疗病毒感染和癌症的干扰素是从动物体内提取的 ，在体外很难保存。 背景知识：用于治疗病毒感染和癌症的干扰素是从动物体内提取的 ，在体外很难保存。 * ？ 改造 ？ 通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构 和功能，并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和基因 重组DNA技术改造基因，以定向改造天然蛋白质， 甚至创造自然界不存在的蛋白质的技术 前提 途径 目的 了解蛋白质的结构和功能 计算机辅助设计、基因定点诱变和基因重组DNA技术 定向改造或制造蛋白质 一、蛋白质工程的基本原理 基因 DNA 氨基酸序列 多肽链 蛋白质 三维结构 预期功能 生物功能 mRNA 转录 翻译 折叠 DNA合成 分子设计 X射线衍射仪 核磁共振法 基因的定点诱变技术（是改变蛋白质结构的核心技术之一） 氨基酸序列 预期功能 根据蛋白质被改造部位的多少,可以将对蛋白质 的改造分成 在蛋白质分子中改变某一个 或一个特定的结构域。 目的： 途径： 方法： 小改: 中改: 大改: 设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质,使之具有特定的______________、空间结构和_____________。 肽段 改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基 改善蛋白质的性质和功能。 结果 适用范围 操作方法 条件 定点诱变技术 项目 原料 脱氧核苷酸 酶 DNA聚合酶和DNA连接酶 引物 含突变顺序的DNA分子片段 空间结构完全清楚的蛋白质 后代中半数为诱变的DNA分子 PCR 基因工程 （1）改变酶的结构，提高酶的热稳定性 ◇替换酶的几种 ； ◇在蛋白质分子中引入 ； 氨基酸 二硫键 （2）生物工程制药 例1：t-PA的天冬酰胺替换为谷氨酰胺 可变区 恒定区 鼠抗体 人抗体 嵌合抗体 减少了鼠源成分，降低了鼠源 性抗体引起的不良反应，而抗 体特异识别功能没有丧失。 优点 例2：嵌合抗体 （3）疾病诊断—蛋白质芯片 抗原-抗体特异性结合 原理 *