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第五节、软离子化质谱解析 一、一般规律 二、ESI质谱多电荷离子峰去卷积法求分子量 三、分子和离子间相互作用 四、应用示例 一、一般规律 准分子离子：MH+, MNa+, MK+, MLi+, MAg+ 碎片离子： MH+-H2O , MH+-CO , MH+-CO2 ,…… Scheme for Backbone Fragmentationof Linear Peptides SORI of Melittin Isolated MH44+ 二、ESI质谱多电荷离子峰去卷积法求分子量 P267 三、分子和离子间相互作用 生物大分子非共价复合物 酶-底物，酶-抑制剂，药物筛选 超分子化学 人工酶，人工受体，自组装 主客体分子 手性识别，包络物 质谱的优势（5S） 软电离技术（soft） 快速（Speed） 灵敏（sensitivity） 样品量少（small amount of sample） 化学计量比信息（stoichiometry） 质谱提供的分子识别信息 分子和分子之间以和数量比作用 分子识别的选择性 分子识别中非共价作用力的大小 直接反映分子识别的本质 手性识别的机制 具有手性的参考分子（主体分子）对要分析的目标手性分子（客体分子）的识别作用。 形成了以弱键相连的复合物，是一个非对映异构体 物理性质有差异，自由能有差异。 高灵敏、快速的手性质谱分析方法 一级质谱的差异（同位素标记的应用） RPI （IAL.R/Iinternal）/ （IAD.R/Iinternal） 二级质谱的差异 R Ifragment/IAL.R / Ifragment/IAD.R 反应平衡测定热平衡函数 分子离子反应 二级质谱裂解分支途径比较 R Ifrgment1/ Ifrgment2 AL.R/ Ifrgment1/ Ifrgment2 AD.R figure ESI FTMS tandem mass spectra of [N2O2Zn II -H]+ from solutions of 20:80 v:v water:methonal containing zinc II salts, S-naproxen and + -Octane upper spectrum or - -Octane lower spectrum . Yu Chongtian,,Yin-Long Guo* Journal of the American Society for Mass Spectrometry 2004; 5 :795-802 2.40 the value “R” of intensity ratio between different diastereomeric complex ions obtained in tetrameric ion or trimeric ion: from left to right are [NO2Zn II -H]+ to [N2Ozn II -H]+ in [N2O2Zn II -H]+, [NOZn II -H]+ to [N2OZn II -H]+ in [N2OZn II -H]+, [NOZn II -H]+ to [O2Zn II -H]+ in [N2OZn II -H]+ and [NOZn II -H]+ to [NO2Zn II -H]+ in [NO2Zn II -H]+. white column represent these complex including + -O, and black column represent these complexes including - -O . N: S-Naproxen, O: 2,6-dihydroxy-biscyclio[3.3.0] octane 3、蛋白质复合物研究 1 溶菌酶与环糊精复合物的初步研究 2 细胞色素 b5与heme的复合 3 环糊精对细胞色素 b5及其突变体稳定性的研究 鸡蛋清溶菌酶-β环糊精1:1和1：5浓度比形成复合物的ESI-TOFMS图谱 Tb5及其突变体 电喷雾质谱得出气相稳定性结果 F35y突变体弱于野生性 Wild type V61H V61K?V61Y?V61E E44,48,56,D60A wild type 环糊精对野生型细胞色素b5稳定性的影响 环糊精对细胞色素b5四点突变体稳定性的影响 4.1 二甲苯异构体的区分 气相中自身分子离子反应（苄基离子m/z91 k300K 8.056×10-2 （间二甲苯）k300K 5.43×10-2 对二甲苯）k300K