常染色体及其X染色体STR在乳腺癌及其妇科肿瘤组织中的变异分析.pdf

111111 111111111111111lUllllIIl lIillitllll 目 录 1 Y258227 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………5 英文缩写．．．…………………………………………………………………．10 研究论文 常染色体及X染色体STR在乳腺癌及妇科肿瘤组织中的变异 分析 前言……………………………………………………+……………11翮吾…………………………………………………………………ll 材料与方法……………………………………………………………12 结果……………………………………………………………………．23 附图……………………………………………………………………28 附表……………………………………………………………………40 讨论……………………………………………………………………48 结论……………………………………………………………………52 参考文献………………………………………………………………52 综述肿瘤患者来源生物学检材的法医学鉴定……………………………55 致谢……………………………………………………………………．：…．67 个人简历……………………………………………………………………68 中文摘要 常染色体及X染色体STR在乳腺癌及妇科肿瘤组织中的变异分析 摘 要 目的：在法医学实践中常会遇到一些特殊案例，肿瘤组织(通常为甲 醛固定石蜡包埋组织)成为唯一的参照样本。然而肿瘤组织存在STR变异， 使同一个体肿瘤组织与正常组织分型不一致。本研究旨在探讨妇科肿瘤组 织和乳腺癌组织的常染色体和X染色体STR变异类型和规律，为此类肿 瘤组织在法医学实践中的应用奠定基础。 方法： 1样本采集：分别采集经病理学诊断明确的63例乳腺癌和62例妇科 恶性肿瘤患者的肿瘤组织和癌旁正常组织，以及lO例妇科良性肿瘤组织 及正常对照组织。其中40例妇科肿瘤样本包含对应的外周血。同时记录 患者的年龄、肿瘤类型、组织类型、临床分期、分化程度等信息。 2DNA提取：分别用动物组织／细胞基因组DNA提取试剂盒和石蜡包 埋组织DNA提取试剂盒提取妇科肿瘤和乳腺癌的肿瘤组织、癌旁正常组 蛋白核酸定量仪定量。 3 21 STR分型：采用PowerPlex X．12试剂盒分别扩增 System和Argus 3130Genetic DNA，共33个STR基因座。ABI v3．2分析结果，得到肿瘤组织、正常组织 电泳分型，使用GeneMapperTM 和血液的STR分型。对比同一个体正常组织与血液的DNA分型和同一个 体的肿瘤组织与正常组织的DNA分型，记录STR变异位点和类型。 4STR变异验证：用重复实验、不同试剂盒间相互验证和单基因座扩 增方法验证STR变异的发生并对等位基因测序确认其发生的机制。 5显微切割：挑选存在STR变异的部分妇科肿瘤组织进行显微切割， 对切取的肿瘤细胞和正常间质提取DNA，扩增并电泳分型；分别对比肿瘤 细胞、正常间质细胞、肿瘤组织、正常组织DNA分型。 6统计学分析：应用Excel、SPSSv16．0软件对上述实验结果进行统 计学分析，用计数法分析各种变异类型的个体水平STR变异率和基因座 水平STR变异率，用Z检验比较不同肿瘤类型、组织类型、