第四章生物信息的传递(下)―从mRNA到蛋白质.ppt

第四章 生物信息的传递（下）――从mRNA到蛋白质 1、遗传密码—三联子 2、tRNA 3、核糖体 4、蛋白质合成的生物学机制 5、蛋白质运转机制 蛋白质生物合成中的三大发现 蛋白质的生物合成步骤 4.1 遗传密码――三联子 4.1.1 三联子密码及其破译 遗传密码的破译 归功于三个经典的生物化学实验： 体外翻译系统的建立 核苷酸结合技术 核酸的人工合成 体外翻译系统 体外翻译系统 体外翻译系统 按一定的碱基比例来合成RNA。 碱基比为U:G＝5:1， 三联体8种：UUU，UUG，UGU，GUU，GGG，GGU，GUG，UGG。 UUU:UGG ＝（5′5′5）:（5′1′1）＝25:1 UUU:UUG＝5:1 根据这样的推测，在无细胞系统中以这种比例合成的mRNA产生的氨基酸的比例也应是相应的，这样可以推测出密码子的组成。如氨基酸测定结果： 苯丙氨酸（UUU）: 半胱氨酸（UGU）＝ 5:1 苯丙氨酸（UUU）: 缬氨酸? （GUU）＝ 5:1 核苷酸结合技术 核苷酸结合技术 核苷酸结合技术 人工合成核苷酸（作为模板，加入dNTP,据合成的多肽链的氨基酸组成，破译氨基酸的密码） 4.1.2 遗传密码的性质 1. 连续性（commaless） 　　 　 2. 简并性（degeneracy） 遗传密码的简并性 　　　密码子简并性的生物学意义：减少有害突变。 　　 　遗传密码的特异性主要取决于前两位碱基。　 　　　GCU　　　　　　　 ACU 　　　GCC　　　　　　　 ACC 　　　GCA　　　　　　　 ACA 　　　GCG　　　　　　　 ACG 3. 通用性（universal） 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。 有少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 4. 摆动性（wobble） 　 4.2 tRNA tRNA为每个三联密码子翻译成氨基酸提供了接合体； 为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供了运送载体（又被称为第二遗传密码）。 各种tRNA形成三叶草形的二级结构。三叶草形tRNA分子上有4条根据它们的结构或已知功能命名的手臂。 4.2.2 tRNA的功能 4.3 核糖体 执行蛋白质合成的功能。 由几十种蛋白质和几种核糖体RNA（rRNA)组成的亚细胞颗粒。 一个细菌细胞内约有20000个核糖体，真核细胞内可达106个。 AA －tRNA进入核糖体和退出核糖体进行新一轮循环 核糖体蛋白 大肠杆菌核糖体小亚基由21种r-蛋白组成，用S1……….S21表示，大亚基由36（34）种r-蛋白组成，分别用L1……L36表示，真核生物中，大亚基含有49种r-蛋白，小亚基由33种r-蛋白组成。 4.3.2 rRNA 4.3.3 核糖体的功能 核糖体存在于每个进行蛋白质合成的细胞中。尽管在不同生物体内其大小有别，但组织结构基本相同，而且执行的功能完全相同。 4.4 蛋白质合成的生物学机制 蛋白质是生物活性物质中最重要的大分子组分，生物有机体的遗传学特性要通过蛋白质来得到表达。 蛋白质的生物合成包括氨基酸活化、肽链的起始、伸长、终止以及新合成多肽链的折叠和加工，现将各阶段的必需成分列于下表。 ◆高度特异性（活化位点） 对氨基酸有极高的专一性 对tRNA具有极高专一性 反密码子 第二套遗传密码系统 ◆校对作用（水解位点） ◆只作用于L-氨基酸 参与翻译的蛋白质因子 4.4.2 翻译的起始 细菌中翻译的起始需要如下7种成分: ①30S小亚基， ②模板mRNA， ③fMet-tRNAfMet， ④3个翻译起始因子(IF-l、IF-2和IF-3)， ⑤GTP， ⑥50S大亚基， ⑦Mg2＋。 翻译起始又可被分成3步。 核蛋白体大小亚基分离 核蛋白体大小亚基分离 mRNA在小亚基定位结合 起始氨基酰tRNA结合到小亚基 核蛋白体大亚基结合形成起始复合物 真核生物翻译起始复合物形成 进位 转位（成肽） 移位 移位 　 　　　原核生物蛋白质合成的能量计算 4.4.5 蛋白质前体的加工 1、 水解 N末端的(甲酰)甲硫氨酸的切除. 在去甲酰酶催化下将肽链合成的起始氨基酸-甲酰甲硫氨酸水解脱掉甲酰基，以便肽链形成所需的构象. 在氨肽酶催化下切去N末端一个或几个氨基酸。 多肽链还未释放时，上两个过程已发生。而真核生物15-30氨基酸时，就已开始上过程。 水解断裂 如动物体中蛋白酶形成的是无活性的酶原，到消化道后，水解切下一部分肽链，使酶原变成有活性的酶。 2、氨基酸侧链的修饰 脯氨酸、赖氨酸侧链