杜氏盐藻高产玉米黄素突变株诱变筛选与生物学特性及研究.pdf

善 量 I ▲ 摘 要 本实验通过Uv辐照和NTG诱变处理杜氏盐藻野生型藻株得到一株杜氏盐藻高 产玉米黄素突变株Zeal，以此突变藻株为实验材料，系统研究了光照强度、盐浓度、 碳源、氮源、磷源等对Zeal生长和玉米黄素积累合成的影响；分别比较了一次添加 型、不完全更换型、分次添加型、完全更换型四种培养方式对Zeal生长和累积玉米 黄素的影响。 3000 分别比较了强光照(HL5000Lux)、正常光照(NLLux)、低光照(LL500Lux) 对野生型和突变型藻株生长和累积玉米黄素的影响。结果显示，在同等光照条件下， 突变型藻株藻细胞数和玉米黄素的积累都略高于野生型藻株。强光照明显有利于突变 藻株藻细胞生长和玉米黄素积累，藻细胞数量分别为低光照和正常光照下的7．08和 1．29倍，玉米黄素含量分别是低光照和正常光照下的4．56和1．4倍。培养基“老化 不利于突变藻株生长和藻细胞积累玉米黄素，而实验组有利于突变株藻细胞的生长和 玉米黄素的积累，分别在12d时达到对照组的3．02倍、12．6倍。0．75mol／LNaCI浓度 比，葡萄糖在中浓度时既适合Zeal生长，又有利于其玉米黄素的积累，效果最佳。 时在此浓度下也最适宜突变株藻细胞的生长。 响应面分析实验得出藻细胞数和玉米黄素含量分别对葡萄糖浓度、(NH4)2S04浓 度、KH2P04浓度的多元回归方程，方程的因变量藻细胞数与玉米黄素含量和全体自 变量之间的线性关系显著，实验方法可靠。响应面图反映了C源、N源、P源三因素 f’ 对Zeal藻细胞数和玉米黄素含量响应值的影响，比较可得出，N源浓度(x2)对两个响 f， 应值的影响最为显著，P源浓度(X3)与C源浓度(x1)次之。通过回归方程分析得出突变 厶 藻株Zeal藻细胞生长和积累玉米黄素含量的最优化组合为：葡萄糖为12．33mmol／L， 别为2．27％和2．8％，都低于5％。说明采用响应面分析法优化得到的参数准确可靠。 分别比较了一次添加型、分次添加型、不完全更换型和完全更换型4种培养方式 对Zeal生长和累积玉米黄素的影响，完全更换型的培养方式培养最有利于突变株藻 细胞的生长和玉米黄素的积累。 对盐藻进行UV辐照处理，在0～60s的紫外辐照范围内，盐藻藻株的存活率随着 辐照时间的增长显著下降。加入小鱼汤后，相同的紫外辐照时间，盐藻的存活率差别 不大，小鱼汤对藻株的保护作用并不明显。对盐藻进行NTG诱变处理，在 理时间，盐藻的存活率差别明显。在NTG诱变处理下，小鱼汤对藻株的保护作用明 显。 关键词：杜氏盐藻，玉米黄素，诱变，影响因素，响应面实验 蠡 ， ‘I-