一轮复习之细胞工程.pptVIP

1、概念： 七、动物细胞融合 两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 (1)原理： 细胞膜的流动性 得到杂交细胞 诱导方式 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒(与植物细胞杂交不同点) 离心、振动、电刺激； 聚乙二醇； 2、诱导融合的方法： (2)结果： 3.植物、动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合的方法 诱导方法 用途 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞膜的流动性细胞的增殖 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 1、概念： 单克隆：一个细胞经过无性繁殖（多次有丝分裂）形成一个细胞群，叫做一个克隆，即单克隆。 单克隆抗体：由一个效应B细胞经过无性繁殖形成一个细胞群产生的化学性质单一，特异性强的抗体，叫单克隆抗体。 八、单克隆抗体 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 （只考虑两两融合）培养液中融合细胞几种类型？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 克隆上述杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 2、单克隆抗体的制备过程 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。 杂交瘤细胞有何特点？ 特异性强，灵敏度高 1.单克隆抗体的优点: 特异性强、灵敏度高、可大量制备 2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因: 每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 3.产生抗体的细胞是: 产生单克隆抗体的细胞是: 效应B细胞（浆细胞） 杂交瘤细胞 思考？ 3.应用 (1)作为诊断试剂： (3)用途 运载药物：制成“生物导弹” 治疗疾病：主要用于癌症治疗 (2)优点： 准确识别各种抗原物质，并与特异性结合 准确、高效、简易、快速 7．利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 (　　) A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B．体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C．将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞 D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不能诊断出SARS病毒感染者 C * 8．(2010·江苏南通一模)下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述，不正确的是 (　　) A．给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的效应B细胞 B．效应B细胞与骨髓瘤细胞混合培养，是为了获得融合细胞 C．杂交瘤细胞进行体外培养，是为了获得单克隆抗体 D．杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎 D 9．下图为单克隆抗体制备流程示意图。 (1)单克隆抗体制备技术的基础是________________。 (2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的__ ______，以保证生命活动的正常进行。 动物细胞培养 筛选杂交瘤细胞 种类和浓度 (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是________________________ ____。 (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是______________________________________________。 使每个孔内不多于 一个细胞，达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度)　 核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜 * * 10、975年Kohler和Milstein的单克隆抗体技术在生产和使用抗体方面开创了新纪元，图10示单克隆抗体制备流程阶段示意图。请据图回答下列问题： （1）该技术是在动物细胞培养 技术和 技术的基础 上发展起来的。 （2）图10中细胞A体外培养 不具有分裂能力，但能分泌 ，细胞B体外 培养能够 。 （3）动物细