《CdTeZnSe核壳量子点免疫层析试纸条检测克伦特罗的研究 Development of CdTeZnSe CoreShell Quantum Dots-based Lateral-Flow Immunoassay for Rapid Detection of Clenbuterol》.pdfVIP

第38卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第12期 2010年12月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 1727—173l DOI：10．3724／SP．J．1096．2010．01727 CdTe／ZnSe核壳量子点免疫层析试纸条检测克伦特罗的研究 胡华军1’2 付涛3 张明洲1’2 洪治4 陈宗伦1 刘军“，2 1(中国计量学院生命科学学院，杭州310018) 2(浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室，杭州310018) 3(中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所，苏州215125) 4(中国计量学院太赫兹技术与应用研究所，杭州310018) 摘要采用巯基丁二酸作为表面修饰剂，水相法合成水溶性的CdTe／ZnSe核壳量子点，然后在Ⅳ．羟基琥珀 酰亚胺(NHS)的作用下，将CdTe／ZnSe核壳量子点与抗克伦特罗多克隆抗体(Anti．CLEpAb)连接。通过凝 胶电泳和斑点杂交实验，验证CdTe／ZnSe核壳量子点与Anti-CLEpAb连接成功，并且CdTe／ZnSe·Anti—CLE pAb偶联物能识别克伦特罗．BSA抗原(CLE．BSA)。光谱分析表明，量子点与抗体连接后荧光增强，荧光峰位 从628nm红移至635nnl。将合成的CdTe／ZnSe．Anti．CLEpAb偶联物作为指示克伦特罗(CLE)分子的荧光标 记物，制备出一种用于检测CLE的免疫层析试纸条，其最低检测量可达1∥L。与ELISA法的对比实验表 明，此试纸条能应用于CLE残留的快速检测。 关键词 CdTe／ZnSe核壳量子点；克伦特罗；免疫层析 1 引 言 疾病。当其使用剂量达到治疗量的5—10倍时，具有调节营养物质流向和重新分配的作用，可使机体肌 肉合成增加，脂肪沉积减少…。若在畜牧生产中大剂量使用可明显提高饲料转化率和瘦肉率，但同时 造成动物性食品中“瘦肉精”的残留。人食用后会对肝、肾等内脏器官产生毒害，出现心悸、头痛、目眩、 肌肉振颤等症状，严重者甚至死亡【2’3】。因此，各国政府都禁止用CLE作为肉用动物的饲料添加剂。我 品中CLE残留量为不得检出。 等特点，在现场检测或样品初筛阶段广泛使用J。近年来，量子点(Quantumdots，QDs)因其优越的荧 光性能，在生物标记与检测领域极具应用价值[6’7】。有研究根据胶体金免疫层析法原理，将量子点代替 胶体金开发一种量子点免疫层析技术，通过分析检测区的量子点荧光强度进行结果判定。相比较胶体 金免疫层析法，量子点免疫层析技术的应用前景也非常广阔怫-11]。本研究组以巯基丁二酸为表面修饰 剂，水相法合成了水溶性的CdTe／ZnSe核壳量子点，该量子点具有良好的生物相容性、高稳定性和低毒 标记抗克伦特罗多克隆抗体(Anti-CLEpAb)作为指示CLE分子的荧光标记物，制备一种用于检测CLE 的免疫层析试纸条。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 2010-05-24收稿；2010-09-20接受 本文系浙江省自然科学基金(No．Y3080390)资助 ·E·mail：liujuncjlu@163．com 万方数据 1728 分析化学 第38卷 (Sartorius)；粘性PVC底板、吸水纸(上海金标生物科技有限公司)。 acid，MSA)、Ⅳ-羟基琥珀酰 自中国医药集团上海化学试剂公司；抗克伦特罗多克隆抗体(Anti-CLEpAb，载体蛋白为血蓝蛋白)、克 anti—rabbit 伦特罗．BSA抗原(CLE—BSA)和羊抗兔二抗(GoatAb)购自美国InternationalDiagnostic 工生物工程有限公司)；本实验所用超纯水由Milli—Q水处理系统(Millipore)制得。 2．2 CdTe／ZnSe核壳量子点的制备及其与Anti-CLE