文冠果组织培养技术地研究.pdf

摘 要 论文以文冠果木质化茎段、成熟胚和叶片为外植体，研究了不同生长调节物 质对外植体愈伤组织分化、不定芽诱导和生根的影响，并通过石蜡切片技术，对 文冠果成熟胚组织培养的细胞学过程进行研究。研究结果表明： 1.文冠果木质化茎段消毒的最佳方式是 5%NaClO 点滴叶腋处+75% 酒精 30s+0.2%HgCl 8min （附加2 滴吐温-20 ）+75%酒精30s，存活率为52.78%，污 2 染率为31.94%，死亡率为15.28%；初代培养诱导茎段产生不定芽试验中，茎段 上切口处可产生不定芽，且不定芽长势较好；茎段在继代培养67d 平均可切取新 芽12.10 株。 2. 初代培养以文冠果成熟胚为外植体，诱导不定芽的适宜培养基是 MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+蔗糖30g·L- 1+琼脂6g·L-1，分化率可达94.7% ； 继代高生长的适宜培养基是MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼 脂6g·L-1，培养50d 后，苗高大于0.5cm 芽数量平均达 11.67 株；生根培养的适 宜培养基是WPM+IBA1.0mg·L-1 +蔗糖30g·L-1+琼脂6g·L-1，生根率为70.30%， 平均根数为 3.57 条。通过石蜡切片显微观察，显示了愈伤组织诱导、愈伤组织 分化不定芽以及不定芽发育过程。 3. 以文冠果幼嫩叶片为外植体，初代培养中诱导非胚性愈伤组织的适宜培养 基是B5+ KT1.0 mg.L-1+2,4-D1.0 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1+水解乳蛋白400 mg.L-1+琼 脂6g.L-1 ；诱导胚性愈伤组织的适宜培养基是B5+KT2.0 mg.L-1+IAA2.0 mg.L-1+ 蔗糖30 g.L-1+水解乳蛋白400 mg.L-1+琼脂6g.L-1 ；继代悬浮培养中，有颗粒状近 球形、长棒状、多角状的愈伤组织出现；在培养后期，培养液中还有球状物、芽 状物和根状物出现；继代固体培养中，愈伤组织可以分化出长势较好，有完整根 系的芽苗，也有部分芽苗还需进行生根培养。 关键词：文冠果；组织培养；石蜡切片；茎段不定芽；叶片再生植株 Studies on the tissue culture of Xanthoceras Sorbifolia Abstract In this paper, to study the effect on the callus differentiation,adventitious buds induction and rooting in different growth regulating substances, we chose stem segments, mature embryos and leaf of Xanthoceras sorbifolia as explants. The paraffin section showed the process of cytological study in tissue culture. The results showed that: 1.The survival way to disinfect stem of Xanthoceras sorbifolia was 5% NaClO drip axils +75% alcohol 30s +0.2% HgCl 8min (add 2 drops of Tween-20) +75% 2 alcohol 30s,the survival rate was 52.78%, the contamination rate was 31.94%, and the mortality rate was 15.28%; in the trial of adventitious buds induction, we can get adventitious buds on