《5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶对乳腺癌细胞CDH4启动子去甲基化的作用》.pdfVIP

中国癌症杂志 2012年第22卷第8期 《 》 CHINA ONCOLOGY 2012 Vol.22 No.8 578 ’ 5-氮杂-2 -脱氧胞嘧啶对乳腺癌细胞 CDH4启动子去甲基化的作用 1,2 2 1,2 1 2 1,2 黄正接 　 易文城 　 尤俊 　 罗维远 　 曾岳岳 　 罗琪 1. 厦门大学附属第一医院肿瘤外科，福建 厦门 361003 ； 2. 福建医科大学第一临床医学院，福建 福州 350004 　　［摘要］　背景与目的：钙黏素(cadherin，CDH)是一类重要的细胞黏附分子，CDH4在恶性肿瘤中表 ’ ’ 达下降的重要机制之一是基因启动子区的异常甲基化。本研究旨在探讨5-氮杂-2 -脱氧胞嘧啶(5-aza-2 - deoxycytidine，5-Aza-CdR)诱导人乳腺癌细胞株MCF-7中CDH4基因启动子去甲基化后该基因恢复表达情况及 功能状态。方法：5-Aza-CdR作用MCF-7细胞后，甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR，MSP)法检测 5-Aza-CdR对MCF-7细胞CDH4启动子甲基化的影响，RT-PCR检测5-Aza-CdR作用前后MCF-7细胞中CDH4的表达， MTT法检测MCF-7细胞的存活率，并通过划痕试验检测5-Aza-CdR处理前后MCF-7细胞迁移力的变化。结果： 5-Aza-CdR逆转了MCF-7细胞CDH4的甲基化状态，CDH4 mRNA表达恢复，且恢复表达程度与5-Aza-CdR药物浓度 呈正比，经不同浓度(10、20和40 μmol/L)处理后，MCF-7细胞的增殖速度明显减慢，与5-Aza-CdR浓度为 P 0 μmol/L的对照组比较，各处理组细胞存活率差异有统计学意义( ＜0.05)，明显抑制了MCF-7细胞的迁移力。 结论：CDH4启动子甲基化导致细胞株MCF-7中CDH4表达沉默，5-Aza-CdR能重新激活乳腺癌细胞株MCF-7细胞中 CDH4的表达，抑制MCF-7细胞增殖和迁移，这可能是其引起乳腺癌细胞株MCF-7生物学行为改变的机制之一。 ’ 　　［关键词］　乳腺癌；CDH4启动子；5-氮杂-2 -脱氧胞嘧啶；去甲基化 　　DOI：10.3969/j.issn.1007-3969.2012.08.004 　　中图分类号：R737.9　　文献标志码：A　　文章编号：1007-3639(2012)08-0578-05 Role of 5-aza-2-deoxycytidine in breast cancer cells CDH4 promoter demethylation HUANG Zheng- jie, YI Wen-cheng, YOU Jun, LUO Wei-yuan, ZENG Yue-yue, LUO Qi (Department of Surgical Oneology, the First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen Fujian 361003, China) Correspondence t