《DR5在GJB2基因条件敲除小鼠耳蜗表达分布及年龄相关性变化》.pdfVIP

Chinese Scientific Journal of Hearing and Speech Rehabilitation 基础研究 doi:10.3969/j.issn.1672-4933.2014.04.009 DR5在GJB2基因条件敲除小鼠耳蜗 表达分布及年龄相关性变化 The Expression of Death Receptor 5 in the Cochleae of GJB2 Conditional Knockout Mice and Its Age-related Changes 1,2 2 1 1 ■崔小缓 张延平 蒋兴旺 李丽娜 CUI Xiao-huan，ZHANG Yan-ping，JIANG Xing -wang，LI Li-na 研究GJB2基因条件敲除（cCx26Pax2Cre ）小鼠耳蜗DR5表达情况，探讨GJB2基因突变导致耳聋的机制。 【摘要】目的 方 法 cCx26Pax2Cre小鼠为实验组，BALB/C小鼠为对照组，分别取P8、P12和P21时小鼠耳蜗行冰冻切片，利用荧光标记免疫组 织化学方法和激光共聚焦显微镜技术观察死亡受体5（death receptor，DR5）蛋白在耳蜗的表达情况，用Image Pro Plus 6.0计算平均光密度值，SPSS 18.0进行统计分析。 P8时DR5主要表达在柯蒂氏器外侧的支持细胞、耳蜗外侧壁Ⅱ型 结果 纤维细胞、盖膜，随着日龄的增加，表达逐渐向内侧延伸到内侧支持细胞，P12和P21时还出现了螺旋缘、毛细胞、螺旋神经节 细胞、螺旋凸DR5表达阳性，而且表达强度随日龄增加而逐渐变强。在野生小鼠DR5也有表达但较弱。与野生型小鼠相比， cCx26Pax2Cre小鼠耳蜗蜗轴螺旋管内神经纤维DR5表达的光密度值明显增大，经统计学分析两者具有显著性差异（ 0.05）。 P 结论 cCx26Pax2Cre小鼠缝隙连接功能异常，可能导致耳蜗细胞出现葡萄糖短缺，导致三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate， ATP)不足，引起DR5的表达上调，直接激活凋亡的死亡受体途径，或间接激活线粒体通路使凋亡信号进一步放大，导致耳蜗 细胞凋亡的发生，最终引起cCx26Pax2Cre小鼠听力下降。 缝隙连接蛋白26；死亡受体5；凋亡；遗传性耳聋 【关键词】 Obj ective 【 】 To observe the expression of death receptor 5 (DR5) in the cochleae of GJB2 conditional Abstract Pax2Cre knockout mice (cCx26 ) and to explore the mechanism of deafness caused by GJB2 gene mutations. Methods The frozen section technique was used to process the cochleae of cCx26Pax2Cre mice (experimental group) and BALB / C mice (control group) at P8, P12 and P21. The immunofluorescence technique wa