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无病毒苗木的培育.ppt
脱毒技术在菠萝、香蕉、草莓、马铃薯、菊花、香石竹、唐菖蒲、水仙、郁金香、百合、大丽花、白鹤芋等主要园艺作物上已成功应用。从根本上解决了植物的退化问题。 一、 无病毒苗培育的意义 1、无病毒苗木的概念 是指不含该植物主要的危害病毒,即经检测主要病毒在植物体内的存在表现为阴性反应的苗木。 通常危害植物的病毒有几百种,并且随着栽培时间的延长,危害程度越来越严重,种类越来越多。尤其是靠无性繁殖的作物,由于病毒通过营养体进行传递,在母株内逐代积累,危害日趋严重。而以种子进行繁殖的种类,可随着世代的交替而去除病毒,病毒只能危害一个世代。 2、病毒在植物上的危害 病毒的危害给植物生产带来的损失很大,如草莓病毒的危害,使草莓产量严重降低,品质大大退化。葡萄扇叶病毒使葡萄减产10%~18%,花卉病毒的危害一般会影响花卉的观赏价值,其表现是花少而小,产生畸形、变色等。 由于病毒对植物造成如此严童的危害,所以世界各国都积极开始重视这方面的研究。 3、无病毒苗培育的意义 1. 去除病毒危害,提高作物品质与产量。采用生物、物理、化学等途径防治病毒病收效甚微,甚至毫无成效。而通过组织培养的方法可以脱除严重患病毒植物的病毒种类,提高产量、质量。因此,到60至70年代在花卉、蔬菜和果树等得到广泛的应用。 2. 减少环境污染,有利于保护环境. 栽培去病毒植物可减少药剂的使用。 二、 无病毒苗培育的方法 1、热处理脱毒 2、微茎尖培养脱毒 3、其他途径脱毒 1、热处理脱毒 发现: 1889年印度尼西亚爪畦人发现,患枯萎病的甘蔗(现证明为病毒病),放在50-52℃的热水中保持30min,甘蔗就可去病生长良好。以后此方法被广泛用于防治许多植物的病毒病。 热处理又称温治疗法。 原理: 是当植物组织处于高于正常温度的环境中时,组织内部的病毒受热后部分或全部钝化,不能生成或生成病毒很少,以致病毒含量不断降低从而达到脱毒的目的 。 热处理方法 (1) 温汤浸渍处理 适用:休眠器官、剪下的接穗或种植的材料 方法:50℃左右的温水中浸渍10min至数小时 特点:方法简便易行,但易使材料受伤。 (2) 热空气处理 适用:对活跃生长的茎尖效果较好 方法:将生长的盆栽植株移人温热治疗室(箱)内,一般在35~40℃下处理几十分钟至数月。处理时间因植物而异,如香石竹于38℃下处理两个月,其茎尖所含病毒即可被清除。马铃薯在35℃下处理几个月才能获得无病毒苗。 特点:热处理方法主要缺陷是并非能脱除所有病毒。例如在马铃薯中,应用这项技术只能消除卷叶病毒。因此热处理需与其他方法配合应用,才可获得良好的脱毒效果 。 2、微茎尖培养脱毒 茎尖培养脱毒原理 感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低,生长点(分生组织约0.1~1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。 茎尖培养脱毒,由于其脱毒效果好,后代稳定,所以是目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径。 植物组织内病毒含量随与茎尖距离加大而增加的原因 ① 在植物体内,病毒易于通过微管系统移动,但分生组织中无此系统;病毒在细胞间移动的另一个途径是通过胞间连丝,但它的速度极慢,难以赶上活跃生长的茎尖。 ② 活跃生长的茎尖分生组织代谢活性很高,致使病毒无法复制。 培养基 培养基: 一般以White、Morel和MS作为基本培养基,尤其是提高钾盐和铵盐的含量会有利于茎尖的生长。 植物激素: 其种类与浓度对茎尖生长和发育具有重要的作用。适当提高生长素(0.1~0.5 mg/L)与细胞分裂素的浓度,避免使用易促进愈伤组织化的2,4-D,宜换用稳定性较好的NAA或IBA,细胞分裂素可用Kt或 BA。有时需添加活性炭。 微茎尖培养方法 (1) 外植体的预处理 将带幼叶的茎芽叶片在75%酒精中浸蘸数秒钟(叶片包被严紧的芽,如菊花、兰花)或用0.1%次氯酸钠表面消毒l0min(叶片包被松散的芽,如香石竹,蒜和马铃薯等)。 (2) 茎尖的剥离与接种 在解剖镜下,将灭菌的外植体放在一个衬有无菌湿滤纸的培养皿内(防止茎尖变干 ),用解剖针将叶片和叶原基剥掉,当一个闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来之后,用解剖刀片将分生组织切下来(0.2~0.5mm)
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