植物的脱毒技术.ppt

杨柏云 南昌大学生命科学学院 一、植物脱毒研究简史 1889年，印尼的爪哇人发现，患枯萎病的甘蔗放在50-520C的热水中保持30min，可去除枯萎病。 1936年，Kunkel报道患有桃黄萎病(yellow virus)的植株，在34-360C处理14天可失活。 一、植物脱毒研究简史 1943年，white在体外培养感染了烟草花叶病毒（TMV）的马铃薯，并用枯斑寄主法测定了其根不同部位的病毒含量，发现根尖部位的病毒含量比其他部位少，甚至不存在病毒。随着往成熟区的推移，病毒含量越来越高。 这一发现为茎尖培养脱除病毒提供了理论依据。 一、植物脱毒研究简史 1952年，Morel首先从感染了花叶病毒和斑萎病毒的大丽花植株上切取茎尖，通过组织培养首次获得了无病毒的大丽花； 1954年，Kassanis用热处理防治马铃薯卷叶病以后，这一技术即被用于防治许多植物的病毒病。 一、植物脱毒研究简史 1960年，Morel培养兰属植物的茎尖，实现了去病毒和快速繁殖二个目的，导致了全世界兰花工业的兴起。 现在茎尖培养脱毒法已经成为植物无毒苗生产中应用最广泛的一种方法。 一、植物脱毒研究简史 1972年， Bake 研究表明，植物组织在热水中长时间浸泡常常会窒息死亡，并且这种处理也会打破或延长植物的休眠期。所以现在更常用的方法是将病毒感染的植物用35℃~38℃热空气处理2~4周或者更长时间进行脱毒。 此法尤其适合处理生理干旱的材料和处于休眠状态的果树。 一、植物脱毒研究简史 1984年，Ｓｈｉｍｏｍｕｒａ认为抗病毒剂主要作用是抑制病毒增殖或移动，但抗病毒剂抑制病毒增殖的机理尚不完全清楚,可能是抑制病毒ＲＮＡ磷酸盐的合成或者使某些病毒暂时处于无活性状态。 一、植物脱毒研究简史 1994年，Ｋｉｍ-ＪＹ采用不同浓度的病毒唑加入到培养茎尖的培养基中，分别获得了两个百合品种的无毒苗。关于化学疗法在百合脱毒上的应用效果,并在鳞片培养(Ｏｓａｋｅｅｔａｌ,1996)和愈伤组织培养(Ｘｕｅｔａｌ,2000)实验中得到肯定。 二、培养无病毒种苗的意义 1、病毒对植物外观状态的影响 　花叶型： 也称花叶病。是由于叶绿体结团或退化引起。造成叶片上形成暗绿(正常)、亮绿(结团)和黄色(退化)区域。 环斑型：在叶片、果实或茎的表面形成单线圆纹或同心纹的环、全环或半环，以用连续屈曲状的环，常常和花叶同时发生。 二、培养无病毒种苗的意义 畸形生长型 ：各种反常的生长。 变色型：叶片的局部或全部颜色改变。如褪绿、变黄、变橙、变红、变紫、变蓝绿等。郁金香碎裂病毒感染郁金香，使其花色由单色发生斑驳或纵向条点。 坏死与变质：某些细胞组织死亡或组织质地变软或变硬或木栓化。 二、培养无病毒种苗的意义 二、培养无病毒种苗的意义 2、病毒对作物产量和品质的影响 病毒的危害给作物生产带来重大的损失。如草莓病毒的危害，使草莓产量严重降低，品质大大退化。葡萄扇叶病毒使葡萄减产10～18%，为害马铃薯有几十种病毒，给马铃薯生产带来严重危害，造成减产30%以上。花卉上病毒的危害大大影响其观赏价值，表现花少而小，产生畸形、变色等。 二、培育无病毒种苗的意义 靠无性繁殖的作物，如利用茎（块茎、球茎、鳞茎、根茎、匍匐茎），根（块根、宿根）、枝、叶、芽（顶芽、侧芽、球芽、不定芽）等通过嫁接、分株、扦插、压条等途径来进行繁殖的，随着生产栽培时间的延长，危害越来越甚，种类越来越多，危害也就越来越严重。 已报道的植物病毒达500多种，其中， 核果类：1930年5种，1951年48种，1976年95种； 马铃薯：30余种； 苹果：30余种； 柑桔：20多种。 观赏植物病毒：200多种。 　现在离体培育无病毒苗(virus-free plant)已在生产中发挥重要作用。大蒜经组培脱毒后，蒜头可增产23.3%～114.3%，蒜薹增产58.3%～175.0%；用脱毒草莓苗进行生产，可提高果实产量20.7%～45.5%，果实可溶性固形物含量增加5.3%～15.3%；用马铃薯脱毒苗可提高产量30%以上，甚至成倍增长；甘薯增产在20%以上。 二、培育无病毒种苗的意义 为了提高作物的产量和质量，去除病毒和其它病原菌是非常必要的。虽然通过防治细菌和真菌的药物处理，可以治愈受细菌和真菌侵染的植物，但现在还没有什么药物可治愈受病毒侵染的植物。用组织培养法去除病毒是唯一行之有效的方法。一旦获得了一个不带病原菌的植株，就可在不致受到重新侵染的条件下，对它进行营养繁殖。 三、植物快速繁殖的途径和方法 1.??无菌短枝型（微型扦插）（节培法）：外植体为单芽的茎段，转入成苗培养基，一定时间后可成苗，再剪成带一叶的单芽茎段继代又可成苗，这种方法为多数园艺家们所推崇，因为它不经过发生愈伤组织而再生，是最能