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第六章 酶工程制药 酶工程是酶学和工程学相互渗透结合发展而形成的一门新的技术学科。它是从应用的目的出发研究酶、应用酶的特异性催化功能,并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。 二、酶的来源 大多数生物都是有用酶的来源,但只有有限数量的植物和动物是经济的酶源,多数酶是从微生物获得的。植物和动物来源的酶一般是食品工业的重要用酶。 2.动物酶来源的酶 猪胰蛋白酶和胃脂肪酶等。 3.微生物来源的酶 ④ 利用微生物可以生产一些极端酶 由于酶在应用过程中常出现不稳定现象,尤其在高温、强酸、强碱和高渗等极端条件下更易失活,因此限制了酶在工业上的应用。利用嗜极菌生产的极端酶可克服这一缺陷。第一个极端酶——嗜热DNA聚合酶已成功地应用于PCR技术 。 三、酶在医药领域的应用 在疾病诊断方面的应用 在疾病治疗方面的应用 在药物生产方面的应用 在分析检测方面的应用 1.在疾病诊断方面的应用 酶学诊断方法是可靠、简便又快捷的诊断方法。包括两个方面:(1)根据体内原有酶活力的变化来诊断某些疾病;(2)利用酶来测定体内某些物质的含量,从而诊断某些疾病。 (1)根据体液内酶活力变化诊断疾病 一般健康人体液内所含有的某些酶的量是恒定在某一范围的,若出现某些疾病,则体液内的某种或某些酶的活力将会发生相应的变化。故此,可以根据体液内某些酶的活力变化情况,而诊断出某些疾病。 2.在疾病治疗方面的应用 酶作为药物可以治疗多种疾病。而且具有疗效显著、副作用小的特点,应用日益广泛。 蛋白酶可作为消炎剂,治疗各种炎症有很好的疗效。蛋白酶之所以有消炎作用,是由于它能分解一些蛋白质和多肽,使炎症部位的坏死组织溶解,增加组织的通透性,抑制浮肿,促进病灶附近组织积液的排出并抑制肉芽的形成。给药方式可以口服、局部外敷或肌肉注射等。 (2)溶菌酶 溶菌酶也是一种应用广泛的药用酶,具有抗菌、消炎、镇痛等作用。 溶菌酶作用于细菌的细胞壁,可使病原菌,腐败性细菌等溶解死灭,对抗生素有耐药性的细菌同样起溶菌作用,具有显著疗效而对人体的副作用很小,是一种较为理想的药用酶。溶菌酶与抗生素联合使用,可显著提高抗生素的疗效。 (3)用酶制造各种药物 酶在药物制造方面的应用是利用酶的催化作用将前体物质转变为药物。现已有不少药物包括一些贵重药物都是由酶法生产的。例如: (4)酶在分析检测方面的应用 利用酶催化作用的高度专一性对物质进行检测,巳成为物质分析检测的重要手段。 单酶反应检测 L-谷氨酸脱羧酶 L-谷氨酸脱羧酶专一地催化L-谷氨酸脱羧生成?-氨基丁酸和二氧化碳,生成的CO2可以用气体检测法测定。 该酶巳广泛地用于L-谷氨酸的定量分析。可使用游离酶、固定化酶或酶电极。 检测CO2可以用华勃氏呼吸仪或CO2电极等。 脲酶 脲酶能专一地催化尿素水解生成氨和CO2。 通过气体检测或者使用氨电极、 CO2电极、NH4+电极等,测出氨或CO2的量,就可确定尿素的量。 葡萄糖氧化酶 该酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和H2O2。 通过测定酸的生成或氧的减少来确定葡萄糖的量,也可用pH电极、氧电极等测出葡萄糖的量。该酶巳广泛用于食品,发酵工业和临床诊断等方面。 多酶偶联反应检测 多酶偶联反应检测是利用两种或两种以上的酶的联合作用,使底物通过两步或多步反应,转化为易于检测的产物,从而测定被测物质的量。 多酶偶联反应检测可克服单酶检测易出现的其他物质干扰,或检测的灵敏度不高等缺点,使酶法检测易于进行并达到较理想的结果。 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和H2O2,生成的H2O2在过氧化物酶的作用下分解为水和原子氧,新生态的原子氧将无色的还原型邻联苯甲胺氧化成蓝色物质。颜色的深浅与样品中葡萄糖浓度成正比。随着样品中葡萄糖浓度的增加,酶试纸的颜色由粉红一紫红一紫色一蓝色,不断加深。其反应过程如下: 酶标记免疫反应检测 用于测定样品液中抗体或抗原含量的技术。 先将适宜的酶与抗原或抗体结合在一起。若要测定样品中抗原含量,就将酶与欲测定抗原的对应抗体结合,制成酶标抗体,反之,若要测定抗体,则需先制成酶标抗

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