体外受精和早期胚胎培养自制.ppt

1、对实验动物小鼠、兔和小家畜,猪、羊等动物如何采集卵子？ 促性腺激素处理，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。（超数排卵处理） 2、对于大家畜或大型动物如何采集卵子？ ①从屠宰场已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞。 ②借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。（活体采卵） 体外经人工培养至MII中期 1、培养液成分： 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及水、动物血清等。 谢谢 * 有关试管婴儿的资料： 1978年7月26日，世界首例试管婴儿“路易斯．布朗”在英国诞生，现已成为母亲。 1988年3月10日我国首例试管婴儿 1992年我国首例三胞胎试管婴儿 上述资料用到了试管婴儿技术，包括体外受精、早期胚胎的培养和胚胎移植技术，请问试管婴儿和母亲正常怀孕的过程有何异同？ 相同之处： 都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育成成熟胎儿。 不同之处： 体外受精，并在体外发育成早期胚胎，然后再进行胚胎移植。 学习目标： 1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。 3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，再经移植产生后代的技术。 体外条件 人工操作 早期胚胎 试管动物技术概念： 思考：什么是试管动物技术？ 待解决的问题： ▲国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右 ▲引进一头良种成年奶牛需要3万－5万元； ▲牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生 只能生育四五次。 ▲牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞 相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生 中排卵数多1000倍左右； ▲牛产生的精子数目就更多了。 一、从试管牛说起 试管动物技术过程： 第一步：体外受精 第二步：早期胚胎的培养 第三步：胚胎移植 请同学们设计并绘制“试管牛”工厂化生产的技术流程图解。 胚胎移植 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 受体牛（本地牛如黄牛） 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 1982年世界首例试管犊牛问世 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 的培养。 体外受精 早期胚胎 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念：采取雌性动物的 和雄性动物的 ，使其在 中受精。 二、体外受精 卵母细胞 精子 试管 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 自学指导：阅读P69—70思考以下问题： 1、如何使雌性动物排出更多的卵子？ 2、对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？ 3、对于大家畜或大型动物如何采集卵子？ 4、采集的卵子是否马上可以受精？ 自学检测： 牛卵巢 牛卵巢中采卵 B超活采仪 超声波引导法： 借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。 操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 牛卵巢 牛卵母细胞 体外受精胚胎 小结：1、卵母细胞的采集和培养 （1）超数排卵处理 （2）从屠宰场已屠宰 母畜卵巢中取卵 （3）活体采卵 注意：（2）和（3）两种方法采集的卵母细胞需在体外培养成熟（MⅡ中）后才能与获能的精子受精。 适用于实验动物小鼠、兔和小家畜,猪、羊等。 适用于大家畜或大型动物，如牛等。 2、精子的采集和获能 （1）收集的方法: ①假阴道法、②手握法、③电刺激法等。 （2）获能处理: ①培养法：把精子放入获能液中。 （啮齿动物、家兔和猪） ②化学诱导法：把精子放入一定浓度肝素或钙离子载体A23187溶液中。 （牛、羊等家畜） 3、受精 获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或 中完成受精过程。 获能溶液 专用的受精溶液 3、不同动物的胚胎移植时间不同 （1）检查________ 和_____________ 力。