丹酚酸B对局灶性脑缺血小鼠抑制自噬及其凋亡机制研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………6 研究论文丹酚酸B对局灶性脑缺血小鼠抑制自噬及凋亡机制的研究 前言……………………………………………………………………………………………．13日{j舌……………………………………………………………………………………………．1j 材料与方法……………………………………………………………．．14 结果……………………………………………………………………．．31 附图……………………………………………………………………．．39 讨{仑……………………………………………………………………………………………．49 结论……………………………………………………………………………………………．51 1 参考文献…………………………………………………………………5 综述缺血半暗带概念的进展………………………………………………55 致谢……………………………………………………………………………………………………58 个人简历……………………………………………………………………．．60 万方数据 中文摘要 丹酚酸B对局灶性脑缺血小鼠抑制自噬及凋亡机制的研究 摘 要 目的：脑血管病是导致我国成人残疾和死亡的第一原因，其中以缺血 性脑血管病最为常见。脑缺血后继发性脑损伤是病情加重及影响预后的重 要原因，氧化应激、炎症反应、细胞凋亡及线粒体功能异常、钙超载、兴 奋氨基酸毒性、自噬等因素均有参与。缺血性脑血管病机制复杂不明，目 前缺乏有效治疗手段，是亟待解决的医学问题。 急性局灶脑缺血中，氧化应激可介导梗死区域继发性神经元死亡。自 噬在缺血再灌注情况下是一把双刃剑，细胞可启动适度的自噬来清除受损 细胞器及异常折叠蛋白质，对细胞起到重要的保护作用，但不完全或过度 自噬现象可能导致细胞死亡。近来越来越多的实验证据表明，氧化应激能 诱导自噬的发生，并且，应用抗氧化剂能抑制自噬并减少细胞死亡。 acid 丹酚酸B(SalvianolicB，SalB)是一种提取自丹参的水溶性单 体成分，具有强大的抗氧化作用及其他多种生物学活性。SalB可以通过 抑制凋亡的机制保护缺血心肌细胞，也有文献报道SalB可通过抑制自噬 来保护饥饿状态的心肌细胞。 本实验旨在研究SalB这一氧自由基清除剂对急性期局灶性脑缺血小 鼠是否存在脑保护作用，且其作用机制是否为抑制凋亡及自噬水平。 鼠右侧pMCAO模型。实验分为三部分： 实验一：探究SalB对急性期局灶性脑缺血小鼠的脑保护作用 10mg／kg，Sal—L)、丹酚 生理盐水)、丹酚酸B低剂量组(pMCAO+SalB 酸B高剂量组(pMCAO-I-SalB25mg／kg，Sal—H)。各组小鼠按照统一标准 进行麻醉与造模，造模成功后，药物干预组即刻腹腔注射SalB，Sham组 和pMCAO组用则给予等量生理盐水。术后24 法对小鼠进行神经功能缺损评分。评分完毕后将动物断头处死，用干湿重 法测定脑组织含水量，用TTC染色法测定脑梗死体积，用伊文斯兰染色 法测定血脑屏障通透性，用western 万方数据 中文摘要 量，用尼氏染色法测定梗死交界区神经细胞损伤情况，用电镜观察超微结 构改变(梗死皮层超微结构如自噬体的形成、细胞凋亡情况和微血管损伤 情况等)。 实验二：局灶性脑缺血小鼠各因子分区表达 blo