2015-2016学年高二生物学案：专题5 课题1《DNA的粗提取与鉴定》（新人教版选修1）.docVIP

课题1　DNA的粗提取与鉴定 一、DNA的粗提取和鉴定 1．DNA的粗提取(1)基本思路：利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异提取DNA去除其他成分。(2)方法和原理：和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解而使杂质沉淀或者相反以达到分离目的。不溶于酒精但是某些蛋白质则可溶于其中。蛋白酶能水解DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60～80_℃的高温而发生变性而DNA在80_℃以上才会变性。洗涤剂能瓦解细胞膜但对DNA无影响。的鉴定在沸水浴的条件下遇二苯胺会被染成蓝色。选取实验材料选用DNA含量较高的生物组织成功的可能性更大。破碎细胞获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易例如在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水同时用玻璃棒搅拌过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞需要先用洗涤溶解细胞膜。去除滤液中杂质(1)方案一：通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。(2)方案二：直接向滤液中加入嫩肉粉反应～15 min嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。(3)方案三：将滤液放在60～75_℃的恒温水浴箱中保温10～15 min注意严格控制温度范围使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未变性可以将DNA与蛋白质分离。的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的4.95%酒精这一原理可从滤液中析出较纯净的DNA此时DNA的状态为白色丝状物。的