2015-2016学年高二生物学案：专题5 课题2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》（新人教版选修1）.docVIP

课题2　多聚酶链式反应扩增DNA片段 一、PCR的原理及反应过程 1．生物体内DNA复制的条件(1)原料：4种脱氧核苷酸。(2)模板：解旋后的每一条DNA母链。(3)酶：打开DNA双链的解旋酶和合成DNA单链的聚合酶。(4)引物：为DNA聚合酶的起始提供3′末端。扩增的原理(1)概念：PCR即多聚酶链式反应是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。它能以极少量的DNA为模板在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。(2)原理：变性：在80_～100_℃的温度范围内的结构将解体双链分开这个过程称为变性。②DNA复性：当温度缓慢降低后两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链这个过程称为复性。合成：DNA聚合酶从引物3′端开始延伸DNA链的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。(3)条件：模板：解旋后的每DNA母链。引物：能分别与两条模板链结合的两种引物。原料：4种脱氧核苷酸。酶：耐热的DNA聚合酶。其他条件：需要稳定的缓冲溶液和能自动调节温度的温控设备。的反应过程PCR的实验操作 1．实验用具(1)PCR仪：该仪器能自动调控温度实现DNA的扩增。如果没有PCR仪可用3个恒温水浴锅代替操作时按程序在3个水浴锅中来回转移PCR反应的微量离心管。(2)微量离心管：0.5mL，实际上是进行PCR反应的场所。(3)微量移液器：用于向微量离心管中转移PCR配方中的液体每吸取一种试剂后其上的一次性吸液枪头都