反转录酶的新时代.docVIP

反转录酶的新时代 之一 具有高扩增活性，高热稳定性的反转录酶 反转录酶，又称逆转录酶，是依赖RNA为模板的DNA聚合酶的统称。美国科学家H.M.Temin和D.Baltimore在1970年发现了反转录酶，并因此获得了1975年的诺贝尔生理学医学奖。反转录酶的发现对遗传工程技术起来到了巨大的推动作用，是研究真核或者原核生物目的基因，构建cDNA文库等实验不可或缺的工具，与Taq酶等共同构成了现代生物技术的的基础工具酶。 目前已经商品化的反转酶主要有，AMV（avian myeloblastosis virus）和m-mlv（molomey murine leukemia virus）两种反转录酶。AMV来源于禽成髓细胞瘤病毒，最适反应温度在42℃，具有较强的反转录活性和RNase-H活性， RNase H是一种核糖核酸内切酶，它能够特异性地水解杂交到DNA链上的RNA磷酸二酯键，故能分解RNA/DNA杂交体系中的RNA链。D2640S），b1、b2百泰克公司m-mlv supermo (200U，货号PR6811),c1、c2百泰克公司m-mlv super III (200U，货号PR6811),d1、d2invitrogen公司SuperScript? III (200U，货 图2以小鼠总RNA为模板，反转录温度50℃，a1、a2百泰克公司supermo I