瑞士乳杆菌H9发酵特性和降血压效应地研究.pdf

摘 要 本文系统研究了分离自传统发酵酸牦牛奶样品的具有ACE 抑制活性益生乳酸 菌Lactobacillus helveticus H9 的发酵特性和降血压效应。 首先比较分析酸、有机溶剂、EDTA 和加热等四种酶失活方法对体外ACE 抑制 活性评价结果的影响，确定了应用加热或加EDTA 溶液的方法使ACE 失活的具有 高稳定性的ACE 抑制活性体外评价方法。 其次，系统研究了发酵温度、发酵时间、蛋白含量、复配发酵等因素对L.helveticus H9 发酵乳的ACE 抑制活性、Val-Pro-Pro 、Ile-Pro-Pro 、游离氨基氮含量、滴定酸度 和OD600 的影响，并研究了该菌株按不同接种量在牛乳、马乳和豆乳中的发酵和储 藏期间的ACE 抑制活性、Val-Pro-Pro 、Ile-Pro-Pro 、游离氨基氮含量、滴定酸度和 OD600 的变化。研究表明，复配发酵和发酵介质对L. helveticus H9 发酵乳的ACE 抑 6 制活性具有较大影响。将L. helveticus H9 按5×10 CFU/mL 接入11%的脱脂乳中， 37 ℃发酵，pH 值降至4.3 时，其发酵乳ACE 抑制活性、Val-Pro-Pro 和Ile-Pro-Pro 含量分别为76.1±5.6%、3.590±0.371 µM 和2.280±0.210 µM。该菌株发酵马乳和豆 乳中不产Val-Pro-Pro 和Ile-Pro-Pro ，并且ACE 抑制率明显低于发酵牛乳。 此外，进行了L. helveticus H9 在模拟胃肠液中的耐受性和增殖培养基优化的研 究。研究发现该菌株在模拟胃液和肠液中具有较好的耐受性和增值能力。该菌株在 本文优化增殖培养基中的活菌数比普通MRS 提高近35 倍。 最后，通过血压和靶器官组织镜下观察分析研究、评价了L. helveticus H9 发酵乳 对高血压（SHR）和正常血压（WKY 鼠）的影响。研究表明，该菌株发酵乳对SHR 具有起效时间长、不影响血液循环，并对正常血压大鼠（WKY ）不产生不利影响， 显示了具有较好的体内降血压效应。此外，左心室心肌基因表达模式研究表明，饲喂 L. helveticus H9 发酵乳后SHR 左心室心肌组织细胞的多个与高血压相关基因，例如 肌球蛋白轻链激酶、血栓调节蛋白、内皮型一氧化氮合酶等基因的表达发生了显著变 化。 L. helveticus H9 的菌株来源明确，遗传背景清楚，本论文对该菌株的发酵特性 和降血压效应进行了系统研究，这些工作为该菌株后续研究和抗高血压功能性发酵 乳制品的开发奠定了重要的基础。 关键词：乳酸菌；发酵乳；血管紧张素转换酶；原发性高血压大鼠；发酵特性 A Study on Fermentation Characteristics and Antihypertensive Effect of Lactobacillus helveticus H9 Abstract Here we systematically studied the fermentation characteristics and antihypertensive effects of L. helveticus H9, a probiotic strain isolated from kurut which has ACE-inhibitory activity. In this paper, firstly, an in vitro evaluation method with high stability for determination of the activity of ACE was developed after comparative analysis of four distinct methods utilizes acid, organic solvents, EDTA, and heat. Secondly, the influence of ferment