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第十七章噬菌体的裂解途径和溶原化途径的选择和调控 第一节 λ噬菌体的基因组及早、晚期转录 一. 裂解的级联调节 λ噬菌体长48502nt 共61个基因,其中32个较为重要 溶原化周期 (LYSOGENIC ) 裂解周期(LYTIC) ?噬菌体的早,晚期转录 二.反终止作用 第二节 溶原化途径的维持 一、CI蛋白功能 清晰的噬菌斑(Clear plaquea) RM:repressor maintenance 二.CI蛋白的结构 分子量为27KDa,具有两个功能区 (1) N端功能区,1~92aa,操纵基因结合区; (2) C端功能区,132~236aa,负责形成二聚体。 CⅠ蛋白 的结构 UV可激活Rec蛋白,活化的Rec蛋白可剪切CⅠ蛋白 CⅠ蛋白的N端含有5个?螺旋,第2和第3个?螺旋形成HTH(螺旋转角螺旋) CⅠ蛋白二聚体N端的HTH和DNA结合,螺旋3位于DNA的大沟 CⅠ蛋白与DNA结合的信号 螺旋2上具有正调控区,此区靠近RNA聚合酶及DNA上的磷酸化位点 CⅠ蛋白的合成是通过CⅡ蛋白激活和RNA聚合酶在PRE上的转录 三.阻遏物与DNA的结合及调机制 螺旋转角螺旋(helix-turn-helix,HTH) 识别螺旋(recognition helix) 四.反义RNA调控 1.PAQ 抑制 Q 基因 表达 2.P RE 抑制 cro 基因 表达 五.反向调节 游离λ噬菌体 P L启动子转录的RNA是否会产生 sib 位点? 游离λ噬菌体 P I启动子转录的RNA是否会产生 sib 位点? 原噬菌体λ的 P L启动子转录的RNA是否会产生 sib 位点? 第四节 Cro蛋白的功能 小分子二聚体(每个亚基为9KDa) 具有两种效能: (1) 阻止启动子PRM转录; (2)也可抑制从PL和PR起始的早期基因的表达。 第五节 溶原化和裂解周期平衡 进入溶原化 1.营养耗尽 未发现cAMP-CAP对λ基因表达的调控 对宿主: 抗溶原基因hfl 水解CⅡ蛋白 cAMP-CAP himA 整合酶亚基 2.感染复数(multiplicuty of infection,MOI)过高 CⅡ:a.启动PRE b.启动P i c.启动P AQ CⅡ单体无活性,形成寡聚体才有活性 * * *
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