乙肝相关性肝病肝脏内干细胞样细胞的特性和定向分化.pdf

材料和方法 我们收集了我院20例手术切除的肝癌组织、相应的癌旁组织和10肝硬 陷缺疫免和行进织组例5了选挑别分们我中织组种三的上以从。本标织组化 。植种胞细的胞细母维纤的后养培离分和植种块织组的鼠小 CD90、 免疫组织化学染色(mC)ABC法检测三种组织样本中c拙、CDl33、 不离分。照对性阴为作抗一替代BSP以。等91．KC和8lKC、43DC 同组织样本中的纤维母细胞，分别以细胞免疫组化、流式细胞术、免疫荧光 技术和蛋白免疫印迹技术等实验方法，观察纤维母细胞CD73、CD44、CD34、 瀛幅丽缩霹翻谪蕊压嘲睫辅蕊蓁群赫箭薹；箱满雾；糖基荫囊疆雾i磁鼍泳 俐萎肝血霾：疆蚤瞒喇恻穗刈劲雾i霎囊i篓。萋鍪i国塞萎霉 有利于 降低移植术后复发和转移。 4．2辅助性治疗与复发 越来越多的研究开始关注移植前的辅助性治疗(p∞．LTne0．a西uvant )对移植后肝癌复发和生存的影响。有研究认为，肝移植术前经导管动 廿：Iempy 脉插管化疗 (’rACE)治疗可以有效预防等待肝移植期间的肿瘤进展【371，减少 肿瘤体积， 在移植前有效治疗肝癌【3引，从而提高肝移植实施率，降低术中操作 难度，延长无瘤生存期。0ltto等f39，删甚至认为观察病人术前对T们E的反应性是 合理选择肝癌肝移植对象的一项生物学选择标准。但是也有不少研究表达了不 同的观点， 瘤复发的危险因素是临床分期和肿瘤的低分化，而与术前TACE和术后免疫抑 制剂雷帕霉 治疗情况将132例肝癌移植病人分为选择性接受TACE治疗、紧急接受1-ACE治 疗和不接受TACE治疗三组，结果发现选择性接受1’ACE治疗组的病人的1、3、 5年生存率分别为91％，80％和72％，而紧急接受TACE治疗组的病人是79％， 结 果 对肝硬化、肝癌和癌旁组织中的干细胞表面标记的免疫组化分析结果显示， 非癌组织中的干细胞标记的表达高于癌组织。不同组织内呈现不同的干细胞表 达模式。CD34和CD90阳性表达部位多集中在增殖的胆管上，它们在细胞形态 学上往往代表肝脏祖细胞；CDl33和c诎阳性细胞则多分布在肝或肝癌实质中， 它们在形态和空间位置上类似过渡性的中间肝细胞。CK-18和CK-19阳性的细胞 在多数的组织样本中都有表达，部分CK-18和CK-19阳性的细胞散在分布于硬化 肝脏的实质组织中，它们在细胞形态上表现出肝细胞的圆核和多边形细胞膜， 这些细胞代表过渡性肝细胞。 体外实验也表明，来源于乙肝相关性肝硬化和肝癌癌旁组织内的细胞具有 高度的增殖、自我更新和克隆形成能力。 肝硬化肝脏和肝癌组织内的少数纤维母细胞表达间充质干细胞的细胞表面 少部分的纤维母细胞表达干细胞表面标记CD90、c坷t和CDl33。除了极少数的 细胞表达a．平滑肌肌动蛋白外，几乎所有细胞表达波形蛋白、结蛋白、纤维连 接蛋白、纤维母细胞特异抗原。此外，极少的细胞表达CK_18或CK．19但未发现 白蛋白阳性细胞。 在体外特异性的诱导条件下，肝硬化肝脏内的纤维母细胞以一种时间依赖 的方式逐渐分化为肝细胞所特有的多边形细胞形态，而在此过程中伴随着不同 肝系细胞蛋白标记的表达。纤维母细胞胞体由梭型或长梭形形态，培养2周后， 胞体增大、变宽，形状不规则。培麴周后，细胞进一步缩短，变宽，随着培养 时间的延长，细胞逐渐出现肝细胞典型的多边形。 对肝硬化、肝癌和癌旁组织在BN)(小鼠体内的成瘤性研究发现，种植了癌 旁组织的两组共三只小鼠长出了肿块，肉眼观肿块直径大小都约1cm，组织髓 染色表明肿块中心有大片的坏死区域，镜下观，组