BMECs经TCM和ACM条件培养Caveolin-1的表达对比及机制的探讨.pdfVIP

·中文论著摘要· 对比及其机制的探讨 目 的 胶质瘤是常见的脑恶性肿瘤，死亡率较高，目前治疗主要以手术为主，术后 易复发，术后化疗成为其治疗的重要手段，但目前化疗效果不尽理想。主要是由 于血肿瘤屏障(blood-tumorbarrier，BTB)的存在，显著限制化疗药物向脑肿瘤 组织内的转运，而血肿瘤屏障主要由脑微血管内皮细胞和脑胶质瘤细胞组成的紧 密连接组成，紧密连接是维持血脑屏障和血肿瘤屏障的结构和功能基础。临床实 践和实验研究表明胶质瘤组织中的血肿瘤屏障与正常脑组织的血脑屏障在结构和 功能上存在着很大差异，这可能是内环境改变所致。近年来，国外学者的研究证 实通过比较蛋白质组学的研究发现肺癌周围的微血管内皮细胞高度表达某些特异 性蛋白，而这些蛋白大多参与内陷微区的构成，验证了组织微环境改变可以引起 周围血管内皮细胞表型改变这一假设。大多数哺乳动物细胞特别是内皮细胞的细 胞质膜均存在烧瓶状的内陷微区结构，即质膜微囊(Caveolae)，质膜微囊被认为 标志性蛋白，是质膜微囊的结构蛋白和最好的生物标记物。本研究通过制备大鼠 ConditionedMedium，TCM)和星形细胞培养 C6胶质瘤细胞条件培养液(Tumor Conditioned 液条件(Astroctye MicrovascularEndothelial blot检测 Cells，BMECs)，再通过免疫荧光和Western 胞Cave舱lin-1表达的影响，以进一步影响血脑屏障的通透性，为进一步开发新型 高选择性靶向性的胶质瘤化疗药物载体提供理论依据。 方法 l、对脑微血管内皮细胞进行原代培养。 2、对原代培养后的脑血管内皮细胞进行随机分组。 3、实验组以大鼠C6胶质瘤细胞条件培养液进行培养，对照组以星形胶质细 胞培养液进行培养。 4、分别对实验组和对照组中Caveolin．1进行免疫荧光染色。 5、Western 5500V2．03 blot检测Caveolino1表达和分布。结果用Chemi Imager 软件扫描，FluroChen2．0软件定量分析显色条带的IDV数据。 6、统计学分析使用SPSSl3．0软件，所有数据以均数士标准差(x4-S)表示， 两组间采用独立样本t检验，口0．05)。 结果 TCM培养细胞中高表达。 2、TCM和ACM培养细胞进行Westernblot蛋白测定显示BMECs中 Caveolin-I在TCM培养细胞中高表达。 皇口结论◆匕 TCM和ACM培养细胞进行免疫荧光观察和Westernblot检测，Caveolin-1在 高表达，从而验证了组织微环境改变可以引起周围血管内皮细胞表型改变这一假 设，对为进一步开发新型高选择性靶向性的胶质瘤化疗药物载体提供理论依据。 关键词 血脑屏障，血肿瘤屏障，Caveolin-1，胶质瘤，TCM，ACM 2 ·英文论著摘要· The of andmechanismofCaveolin·-1 studyexpression inBMECsTCMandACM by objective TheGliomaisafamiliarbrain tumor,the rateis malignant mortal