Ⅱ型猪圆环病毒ORF2基因的毕赤酵母真核表达载体的构建及表达.pdfVIP

II型猪圆环病毒ORF2基因的毕赤酵母真核表达 载体的构建及其表达 摘 要 猪圆环病毒是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原，除PMWS之外，与许多猪 吸道综合征(PImC)、繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病，并且这些相关联的猪的疾病 已在全世界范围内发生和流行，死亡率10．30％不等。较严重的地区，猪场在暴发本病时死淘 率高达40％左右，其危害和造成的重大经济损失显而易见，现已被世界各国的兽医与养猪业 者公认为本病是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后新发现的重要的猪传染病。因此如 何防制该病和尽早检测该病已成为养猪生产面临的新问题。 猪圆环病毒属于圆环病毒科圆环病毒属，无囊膜，二十面体对称，核酸为共价闭合、环 因而该蛋白可以作为检测PCV2抗体的有力诊断工具．毕赤酵母表达系统兼具有原核和真 核表达系统的优点，不仅容易操作、耗时短、培养基廉价，而且最显著特点为毕赤酵母易 于高密度发酵，表达水平相当高，另外，酵母细胞具有对表达产物进行类似真核细胞的蛋 白加工、折叠和翻译后修饰等优点，而且在分泌表达外源蛋白过程中，毕赤酵母本身几乎 不分泌蛋白，所以杂蛋白少，使表达蛋白利于纯化。因而，毕赤酵母为表达重组蛋白提供 了一个良