Tet-on系统诱导表达人突变A30Pα-synuclein小鼠的相关的研究.pdf

Tet．0n系统诱导表达人突变A30P口一夥nuclein小鼠的相关研究 中文摘要 中文摘要 第一部分Tet．orr系统诱导表达人突变A30PQ—synuclein 转基因小鼠的构建 目的构建Tet．0n系统诱导表达人突变A30P洳sylluclein转基因小鼠。 方法通过l汀．PCR方法从人胎脑中克隆野生型sNCA基因，T．A克隆并测序， 并利用单核苷酸差异引物定点诱变构建致病突变Ala30pr0的sNCA基因，采用双 注入FVB小鼠受精卵的雄原核中，注射受精卵移植到同期发情的假孕受体出生个 体，取21日龄的断乳小鼠剪尾法提取DNA，经PCR检测获得阳性转基因小鼠，基 因测序验证A30P的突变位点。 ‘结果 电泳结果显示ImPCR方法成功克隆了SNCA基因的cⅨ叮A序列，目 和肺耐Ⅲ双酶切鉴定正确，测序结果也显示编码小突触核蛋白第30位氨基酸的 突变型口．syIlucleill单阳性转基因F0代小鼠13只。 T晦0111 结论成功构建了受强