《白蜡属SSR—PCR反应体系优化及引物筛选-论文》.pdfVIP

中国屉学c童攉 2014，30(10)：35—41 ChineseAgriculturalScienceBulletin 白蜡属SSR—PCR反应体系优化及引物筛选 王健兵 ，燕丽萍 ，刘翠兰 ．一，李 丽 ，孙 超 ，夏 阳一，屈 星。 (’甘肃农业大学农学院，兰州730070：山东省林业科学研究院，济南250014； 山东省林木遗传改良重点实验室，济南250014) 摘 要：本研究建立了适合 白蜡SSR—PCR反应的最佳体系，并利用该体系从50对 白蜡引物中筛选出了3 对条带清晰、多态性好的引物，用于白蜡SSR标记的进一步研究。该研究采用L (4)正交设计和单因素 试验对影响白蜡SSR—PCR的Taq聚合酶用量、M 浓度、DNA模板浓度、dNTP浓度和引物浓度等5个 因素在4水平上进行筛选。优化后的白蜡SSR反应体系为：M (25mmol／L)0．8 、引物(10ttmol／L) 0．2 、DNTP(10mmol／L)0．3IxL、Taq酶(5U／ )0．05rtL、DNA模板(5-10ng／pL)2．00 、10xPC