五指山小型猪基因组BAC文库的构建和北京油鸡风味特性基因研究.pdf

五指山小型猪基因组BAO文库的构建与北京油鸡风味特性基 因的研究 摘要 抽取一只雄性五指山小型猪静脉血，用于制各大分子量基因组DNA，制备好 的基因组DNA经Hind III部分酶切后，二次脉冲电泳分离所需DNA片段。电洗脱 1载体连接，转化DHIOB感受态 回收100-400kb范围的片段，然后与pBeoBhCl 细胞，经过培养，挑取和保存白色单克隆。基因组文库的质量一般从文库的平均 插入、基因组覆盖率、嵌合率二方面来衡量。本研究所构建中国特有五指山小型 池由10个384孔板组成)。随机挑选了270个BAC克隆的插入片段进行估计，平 均为152．3kb，其中空克隆的比例为1．3％，表明文库的覆盖率7．4倍，预计从 kb， 文库中筛选到单拷贝基因的机率为99．93％。文库中78％的克隆插入大于100 而且有部分克隆甚至大于300kb，这样大小的插入可以满足所有试验对于片段大 小的要