小窝蛋白-1对A549细胞磷酸胆碱二胞苷酰转移酶的影响及其作用机制初探.pdfVIP

本课题受国家自然青年基金项目资助 批准号 摘要 移酶(CTP)表达的影响：探讨核因子r．B(NF．1出)信号转导途径在 磷酸胆碱二胞苷酰转移酶合成中的作用，为临床有关呼吸系统疾病的 研究提供依据和参考。 方法：以研究肺表面活性物质常用的A549细胞作为研究对象，运用 小分子RNA干扰(siRNA)的方法构建小窝蛋白．1低表达模型；并用蛋 白印迹法(westernblot)检Nd,窝蛋白．1的表达变化；实验分组如下： 义链RNA组；④按小窝蛋白．1对磷酸胆碱二胞苷酰转移酶表达影响 分组：转染试剂组(正常对照组)，siRNA处理组(实验处理组)，错 处理组，错义链组；其他实验条件均相同。之后对其进行总蛋白的提 取，随后蛋白印迹法检测磷酸胆碱二胞苷酰转移酶的表达；最后对核 蛋白进行提取并检测核蛋白P65的表达。 结果： 降低。 白．1的表达降低。 siRNA，转染细胞72h，小窝蛋白．1表达下降，转染组与错 3．5I_tmogl 义链组相比，小窝蛋白一1的表达降低。 4．蛋白印迹法检测磷酸胆碱二胞苷酰转移酶表达下降：转染组相对错 义链组小窝蛋白一l的表达明显降低。 5．提取A549细胞核蛋白后蛋白印迹检测胞核蛋白p65，胞核蛋白p65 表达下降。