胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白的克隆表达及其多重荧光PCR诊断方法研究.pdf

胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白的克隆表达及 多重荧光POR诊断方法的研究 中文摘要 猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious 膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus 高度接触性传染病，针对胸膜肺炎放线杆菌血清型众多，．现有疫苗缺乏交 叉保护力，对规模化养猪业造成巨大经济损失的现状，研究开发具有交叉 保护力的新型疫苗迫在眉睫。研究发现Apx毒素是APP的主要保护性抗原， 可提高疫苗灭活疫苗的保护作用。天然毒素提取产量低、过程繁琐且成本 较高，利用体外克隆表达编码Apx毒素结构蛋白的基因，获得的重组蛋白 与天然提取的毒素免疫原性无明显差异，可为下一步新型疫苗多肽成分和 种属特异性的抗原，只存在于自然感染的动物体内，不会与其它放线杆菌 C端特异性和保守性均很强，是首选的诊断抗原和靶基因。 本研究运用蛋白质软件Anthe5．0分析了APP的两个关键毒力因子 心区域，分别从胸膜肺炎放线杆菌血清l型国内参考株259和血清7型国 外克隆，构建了原核表达载体pGEX．4T-1／apxlVA。 H 菌中均