猪圆环病毒Ⅱ型ORF1、ORF3及其ORF5基因部分功能研究.pdf

中文摘要 个阅读框架，其中的许多读框架的功能仍不十分清楚。本研究从病料中直接扩增PCV2 观察，鉴定其对IBRS．2细胞的感染性，并进行动物接种试验，研究其对仔猪的致病性 及免疫原性。目的是为研究上述基因的功能，探讨其对病毒复制能力及致病力的影响， 同时为构建新型基因工程疫苗候选毒株提供新的方法和理论依据。 从成都地区某猪场送检的，经多重PCR方法检测为PCV2阳性的病料中一次性扩增获得 了1 构建了重组质粒pMDl8．T 性高达95．O％～100％。 采用EcoRV、BrngB I双酶切重组质粒pMDl8一T 187bp，获取4 I和BstB 重组质粒pMDl8．T I单酶切pMDl8-T Simple．PCV2．CD．A；分别采用Nco Simple．PCV2．CD获取4459bp线性目的DNA片段，补平、连接环化分别构建了 ORF3、ORF5基因插入缺失重组质粒pMDl8-T 实构建正确。用SacII酶切重组质粒pMDl8-T