专题微生物的实验室培养.ppt

2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 2.稀释涂布平板的操作方法 答：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 ㈠.微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类： 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 个体微小、结构简单 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌： 原生生物： 显微藻类、原生生物（如：草履虫、变形虫等） 病毒、类病毒、朊病毒 ◆微生物的共同特点： 一.微生物基础知识 1.细菌的形态 细菌主要是以二分裂的方式进行增殖（如右图） 2.细菌的繁殖 3.细菌的菌落 ⑴.定义： 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 ⑵.特征： 大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。 ⑶.功能： 每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。 几种菌落及其形态 几种菌落及其形态 4.病毒的结构 :由核酸和蛋白质构成。 病毒的结构 吸附 注入 合成 释放 组装 5.病毒的繁殖 病毒的增殖一般可分五个阶段，即： 吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放 6.病毒的营养方式 ：寄生 微生物需要的五大类营养要素物质是： ㈡.微生物需要的营养物质及功能 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水 ：凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。 ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源 ⑴.概念 ⑵.来源： ⑶.作用： 1.微生物的碳源 ①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。 ②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。 2.微生物的氮源 ⑴.概念： ⑵.来源： ⑶.作用： 3.生长因子 ⑶.常见的生长因子： ⑴.概念： ⑵.作用： 微生物生长不可缺少的微量有机物。 酶和核酸的组成成分。 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。 ㈢.培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。 1.培养基的类型和用途 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容) 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 鉴别培养基 用途 合成培养基 天然培养基 化学成分 物理性质 用途 特点 培养基种类 划分标准 培养基的种类 不加凝固剂 加凝固剂，如琼脂 工业生产 观察微生物的运动、分类鉴定 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 培养基成分明确 分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物 在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 鉴别不同种类微生物 选择培养基 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 液体培养基： 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 back 半固体培养基： (是否运动) 无动力 有动力(弥散) 固体培养基：菌落 分离导入了目的基因的受体细胞 几种选择培养基 加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基 back 血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分 人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。 ㈣.无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 ⑴消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死部份微生物的过程。 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 ⑵灭菌的定义：