外源基因在拟南芥转基因植株中的遗传研究.pdfVIP

中文摘要 外源基因在拟南芥转基因植株中的遗传研究 摘 要 以通过植物原位真空渗入遗传转化所获得的转基因拟南芥(携带目的基因Cumv基因 VI和标记基因hpt)为试验材料，通过自交和杂交，以潮霉素抗性为表型标记性状，采用 遗传学分析和PCR检测相结合的方法，研究了外源基因的遗传稳定性及遗传传递规律，包 括自交后代的外源基因中分离情况，外源基因对配子的影响和外源基因的整合位点分析等。 获得以下主要结果: 1.29个T,代植株的自交后代 (T2代)对潮霉素的抗性分离比例复杂，只有8个植株 的后代符合盂德尔单显性基因遗传模式，大多数偏离3:1的比例，抗性植株比率偏低，说 明外源基因以单位点插入，T，代转基因植株在自交繁殖过程中存在转基因的沉默或丢失现 象。转基因株系在T;代的遗传已比较稳定，符合孟德尔遗传，抗性分离比例表现为3:1或 1:0。随着自交世代的增加，外源基因的遗传性趋于稳定。 2.将得到的4个纯合株系分别与其野生型杂交，正反交结果均为F，代全显性，F2代 潮霉素抗感比例为 3:1，验证了外源基因的单位点插入，潮霉素抗性性状由一对显性基因 控制，转基因在雌雄配子中的传递无差异，不受细胞质的影响。 3.来自不同T:代的4个转基因纯合株系配组杂交，6个杂交组合中除P2XP4外，其 余5个组合的F2代潮霉素抗性分离比为巧:1，说明各组合中外源基因插入到非同源染色体 上;P2XP4组合的抗性株率为99.43%，说明外源基因在P2和P4中可能插入到同源染色体 的不同位点上。 4.对随机选取的潮霉素抗性植株不同世代和杂交后代49株进行PCR检测，48株都获 得了CaMV基因VI的特异扩增条带，表明外源基因CaMV基因VI和hpt在转基因植株中 能稳定连锁遗传。因此，潮霉素抗性可作为转基因植株后代是否具有目的基因的判断指标。 关键词:拟南芥;CaMV基因VI;如t基因;转基因植株;遗传规律 英文摘要 Stu勿oninheritanceofforeigngenesintransgenicArabidopsisthaUana 7iaQingli Abstract Inthisstudy,theinheritanceofforeigngenestransformedintoArabidopsisthalianavia inplantsAgrobacteriam-mediatedtransformationwereinvestigatedwiththeprogeniesofthe transgenicplantscarryingVIgeneofCaMVandhptgene,usingHyg-resistancephenotypic marker,geneticanalysisandPCRdetection.Itanalyzedthesegregationofself-pollinated progenies,theeffectsoftransgenesonthegametesandtheintegratedlocioftransgenesinthe chromosomes.Theconclusionsareasfollowed: 1.ThesegregationofHyg-resistanceoftheprogeniesof29Tiplantsiscomplex,onlythat ofeightplantsfixedtheMendelianfashionof3:1,therestdeviatedtheratio.Therewassingle insertionlocusinthechromosomesofthetransgenicplants.ThepercentageofHyg-resistance plantsislowerthanexpected,possiblyduetothelostorsilenceofforeigngenes.Thesegeration ratioof乃 plantsis3:1or1:0.Italsoshowedthatthetransgenesweredeliveredinthe