聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质.pptVIP

聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在加速剂四甲基乙二胺(TEMED)和催化剂过硫酸铵((NH4)2S2O8，AP) 的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶，以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。 TEMED（加速剂） 过硫酸铵 硫酸根自由基（催化剂） Acr （双链） Acr（长链） +Bis(交联剂) PAG凝胶 不连续体系由凝胶层、缓冲液离子成分、电位梯度、pH因素所组成。浓缩胶是大孔径，分离胶是小孔径；Cl-为快离子、甘氨酸根离子为慢离子、Tris为缓冲配对离子,Cl-PrGly-;浓缩胶缓冲液为pH6.7 ，分离胶缓冲液为pH8.9 ；电极缓冲液是pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液; 电位梯度的差异是自动形成的，在快离子与慢离子之间形成电位梯度，由于Pr的有效迁移率介于快慢离子之间故也就聚集在这个移动的界面附近，被浓缩成狭小的中间层；2种孔径的凝胶、3种缓冲体系、3种pH值使不连续体系形成了，样品得到浓缩。 样品浓缩效应 (a)凝胶孔径不连续性： (b)缓冲体系离子成分及pH值的不连续性；