Bec lin1基因的选择性剪接的研究及其条件敲除小鼠的建立.pdfVIP

中文摘要 Beclin1 基因的选择性剪接研究及条件敲除小鼠的建立 II Beclin1 基因的选择性剪接研究及条件敲除小鼠的建立 中文摘要 中文摘要 第一部分Beclin1 基因的选择性剪接研究 目的：研究儿童急性B 淋巴细胞白血病697 细胞系中的Beclin1 基因的选择性 剪接及其对自噬的调控作用。 方法： （1）提取697 细胞系的总RNA，逆转录成cDNA。 （2 ）在Beclin1 基因的ORF 区的起始密码子上游和终止子的下游设计引物， 以cDNA 为模板，进行PCR 扩增、测序和比对。 （3 ）分析剪接体Del -E11 产生的分子机制。 （4 ）构建GFP-剪接体融合表达的慢病毒载体，研究其亚细胞定位。 （5 ）构建剪接体融合表达的697 细胞系，通过western blot 和Co