鸡堆型艾美耳球虫Hsp90增强型核酸疫苗免疫保护的研究.pdfVIP

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2016-01-05 发布于安徽
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鸡堆型艾美耳球虫Hsp90增强型核酸疫苗免疫保护的研究.pdf

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目录目录摘要……………………………………………………………………………………………．．I 英文摘要………………………………………………………………………………………．．IlI 1弓I言…………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1鸡球虫病研究进展………………………………………………………………………．1 1．1．1鸡球虫病流行情况……………………………………………………………………l 1．1．2鸡球虫生活史…………………………………………………………………………1 ¨．3鸡抗球虫免疫应答……………………………………………………………………2 1．1．4 DNA疫苗在球虫免疫中的应用………………………………………………………．4 1．2Hsp90研究进展……………………………………………………………………………4 1．2．1 Hsp90发现与功能……………………………………………………………………4 1．2．2 Hsp90在原虫中的研究进展…………………………………………………………．5 1．3鸡IL．18研究进展…………………………………………………………………………5 1．3．1鸡IL．18研究概况……………………………………………………………………5 1．3．2鸡IL．18抗球虫免疫佐剂作用………………………………………………………6 1．4研究目的与意义…………………………………………………………………………．．6 2材料与方法……………………………………………………………………………………8 2．1实验材料…………………………………………………………………………………8 2．1．1实验动物与虫种………………………………………………………………………8 2．1．2载体、菌株与细胞……………………………………………………………………8 2．1．3主要试剂………………………………………………………………………………8 2．1．4主要试剂配方………………………………………………………………………一8 2．1．5实验仪器……………………………………………………………………………．1l 2．2实验方法…………………………………………………………………………………11 2．2．1堆型艾美耳球虫Hsp90基因的克隆与鉴定………………………………………．．11 2．2．2 Hsp90的原核表达及鉴定……………………………………………………………15 2．2．3 Hsp90多克隆抗体的制各及其生物学活性测定……………………………………19 2．2．4 Hsp90真核表达质粒的构建、鉴定及体外瞬时转染………………………………．20 2．2．5真核表达质粒的大量制备与纯化……………………………………………………21 2．2．6实验动物分组与免疫…………………………………………………………………22 2．2．7淋巴细胞增殖实验…………………………………………………………………．．23 2．2．8免疫及攻虫后雏鸡增重效果评价…………………………………………………一25 2．2．9十二指肠病变计分…………………………………………………………………．．25 2．2．1 0抗球虫指数计算…………………………………………………………………．．25 2．2．11 2．2．12数据处理……………………………………………………………………………．．26 I 万方数据东北农业大学农学硕士学位论文 3结果………………………………………………………………………………………………………………………．．27 3．1堆型艾美耳球虫Hsp90