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生物化学检验 电解质第二讲.ppt
钾、钠、氯测定及方法学评价 (一)样品的采集和处理 血清、肝素锂抗凝血浆、汗、粪便、尿及胃肠液均可作为测定钠钾样品。 血清或血浆可在2~4℃或冰冻保存。 钾测定结果明显受溶血的干扰,因为红细胞中钾比血浆钾高二十几倍,故样品严格防止溶血。血浆钾比血清低0.1~0.7mmol/L,这种差别是由于凝血过程中血小板破裂释放钾之故。 钠的测定受溶血影响很小。 全血未及时分离或冷藏均可使血钾上升。 (二)方法学 钾、钠的测定方法有:火焰光度法、离子选择电极法、冠醚法和酶法。 氯的测定方法有:离子选择电极法、硫氰酸汞比色法、硝酸汞滴定法和电量分析法(库仑滴定法) 1.火焰光度法: Na+、K+测定可采用火焰光度法。 原理:火焰光度法是一种发射光谱分析法,利用火焰中激发态原子回降至基态时发射的光谱强度进行含量分析。 该法可检测血清、尿液、脑脊液及胸腹水的Na+和K+,该方法属于经典的标准参考法, 3.离子选择电极法(ISE法): 原理:离子选择电极是一种电化学传感器,其结构中有一个对特定离子具有选择性响应的敏感膜,将离子活度转换成电位信号,在一定范围内,其电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系,通过与已知离子浓度的溶液比较可求得未知溶液的离子活度, 优点;ISE法具有标本用量少,快速准确,操作简便等优点。是目前所有方法中最为简便准确的方法。 缺点:电极具有一定寿命,使用一段时问后,电极会老化。 是临床检验中必不可少的医疗器械之一,仪器主要用来从样本中检测钾离子,钠离子,氯离子,离子钙和锂离子。仪器的检测样本可以是全血,血清,血浆,尿液, 透析液,和水化液。 电解质分析仪的工作原理 ?溶液中被测离子接触电极时,在离子选择电极基质的含水层内发生离子迁移.迁移的离子的电荷改变存在着电势,因而使膜面间的电位发生变化,在测量电极与参比电极间产生一个电位差. 钠电极特点:钠电极是一种玻璃毛细管电极用来测定液体样本中的钠离子浓度,主要结构: 电极套:透明塑料。 测量毛细管:钠敏感玻璃。 电极室?:密封的,内充满钠电极液。 电极芯:Ag、Agcl 钾电极特点:钾电极是一种膜电板,也是用来测量样本中的钾离子浓度。 主要结构: 电极套:透明塑料。 测量毛细管:钾离子敏感膜。 电极室:密封的,内充满K+液。 电极芯:Ag/Agcl 氯电极特点:氯电极也是一种膜电极,用来测量样本中的Cl离子浓度。 主要结构: 电极套:透明塑料。 测量毛细管:Cl离子敏感膜。 电极室:密封的且充有Cl-液。 电极芯:Ag/Agcl 参比电极特点:参比电极是连接样本和信号地的一个装置。 主要结构:??参比电极由两部分组成:??参比电极套和参比电极芯。参比电极套中的参比液在以参比电极芯与样本之间形成一个盐桥,每次测量开始时,参比液被注入参比电极套中,同时有一小部分参比液由玻璃毛细管中渗入测量室?,从而在样本和参比电极芯之间形成盐桥,参比电极芯在电信号地和参比液之间形成回路。 测量过程:离子选择式电极,电极内含有已知离子浓度的电极液,通过离子选择电极膜与样本中相应离子相互渗透,从而在膜的两边产生膜电位,样本中离子浓度不用,产生的电位信号的大小也不同,通过测量电位信号大小就可以测知样本中离子的浓度。 电极内液与样本之间的离子浓度差使电极膜产生电化学电位,这个电位可由电极取出,输往放大器的输入端,放大器的另一个输入端与参比电极连接并接地,电极电压可进一步放大。形成电压差,决定着被测样本的离子浓度。 电极溶液中被测离子接触电极时,在离子选择电极膜基质的含水层内发生离子迁移。迁移离子的电荷改变存在着电势,因而使膜面间的电位发生变化;在测量电极与参比电极间产生一个电位差。理想的离子选择性电极对溶液中所要测定的离子产生的电位差,应符合能斯特(Nernst)方程?E=E0+?log10a(x) E:测得的电位 E0:标准电极电位(常数) R:气体常数 T:绝对温度 Z:离子价 F:法拉第常数 a(x):离子的活度 可见测得的电极电位和“X”离子的活度的对数成比例,当活度系数保持恒定时,电极电位与离子浓度(C)的对数也成比例,以此来求出溶液中离子的活度或浓度。 目前生产钠钾氯离子电极分析仪的厂家很多,但所用的电极基本相同,钠多采用硅酸锂铝玻璃电极膜制成,寿命较长,钾电极多采用结页氨霉素膜制成。 离子选择性电极分析仪内的主要组成部分Na+、K+、Cl-电极都有规定的寿命,需要定期更换。一般情况下,经多次保养电极,且保证管道畅通,多次定标仍不能通过的电极,就需更换此电极。 电解质分析仪的使用?? 1. 开机自动定
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