发酵工艺控制-染菌控制2.pptVIP

第八节 杂菌的控制 ◇ 纯种发酵（单菌或混菌）；菌种以外的微生物都被视为杂菌。 ◇所谓染菌，是指在发酵培养基中侵入了有碍生产的其它微生物。 一、杂菌污染的原因、判断与防治 1、 从染菌的现象分析染菌的原因 1）从染菌的时间分析 ● 早期（如接种后12 h或24 h），除了种子带菌外，主要是培养基或设备灭菌不彻底。 ● 相反，中、后期染菌则可能与中间补料、设备渗漏以及操作不合理等有关，也可能是空气过滤器不严所致。 2）从污染的杂菌类型分析 ● 污染耐热的芽孢杆菌，多数是因培养基灭菌不彻底或设备存在死角所致； ● 污染无芽孢杆菌、球菌等不耐热菌，可能是从蒸汽的冷凝水中带来的，或空气系统不严造成。 3）从发酵罐及批次分析 大批发酵罐染菌是指整个工厂各个产品的发酵罐都出现杂菌现象，而且染的是同一种菌，主要是空气过滤器除菌不净，空气带菌而造成的。 个别发酵罐连续染菌，较多地是由于设备问题而造成的。如阀门的渗漏或罐体破损，特别是蛇形管的穿孔，有时不易察觉。 个别发酵罐偶然染菌的原因最为复杂，各种染菌途径都有可能引起。 种子 培养基灭菌不彻底 设备问题 空气除菌不彻底 过程控制操作疏漏 日本抗菌素生产中统计的染菌原因： 从发酵工厂的生产经验来看，染菌原因是以设备渗漏和空气系统的染菌为主. 2、染菌的判断 发现杂菌的方法：镜检方法。 溶氧变化的规律可作为染菌预报的根据。 污染好气性杂菌，溶氧会一反往常在较短时间内下降到接近零，且长时间不回升… 从发酵参数的异常变化判断杂菌污染： 3、 染菌的防治 （1）空气系统 提高空压机进口空气的洁净度，提高空气过滤器的严密性及保持干燥。 如提高空吸气口位置并加强压缩前的过滤；在空气粗过滤器除菌时要防止冲翻介质而短路等。 （2）设备 ● 发酵罐及其附属设备应注意严密和防止泄漏，避免形成“死角”。与物料、空气、下水道连接的阀门皆需保证严密度。 （3）工艺操作 ① 空罐准备 全放罐后立即全面检查和清洗。要清理罐内残渣，去除罐壁污垢，清除空气分布管、温度计套管等处堆积的污垢及罐内的“死角”。检查端面轴封漏气和阀门渗漏等。蛇管和夹层要按设计规定的压力定期试压。空消时应先将罐内空气排尽，保持蒸汽畅通，阀门、管道均要彻底灭菌。 ② 实罐灭菌 配制培养基时要防止原料结块。灭菌时，要保证各路进气畅通及罐内料液翻腾激烈，控制好温度与压力，严防泡沫冒顶及料液倒流到空气系统中。 ③ 连消 料液进入连消塔前需先预热。灭菌过程中，料液温度及其在维持罐停留的时间都必须符合要求，确保灭菌彻底。 ④ 无菌操作