发酵工业的无菌技术.pptVIP

一、发酵工业的无菌处理 七、空气除菌 好气性发酵过程中需要大量的无菌空气，空气要作到绝对无菌在目前是不可能的，也是不经济的。 发酵对无菌空气的要求是 ：无菌，无灰尘，无杂质，无水，无油，正压等几项指标； 发酵对无菌空气的无菌程度要求是：只要在发酵过程中不因无菌空气染菌而造成损失即可。 在工程设计中一般要求1000次使用周期中只允许有一个菌通过，即经过滤后空气的无菌程度为N=10-3 1、空气除菌的方法： 辐射杀菌 ? 热杀菌? ? 静电除菌 过滤除菌 2、过滤除菌 过滤除菌是采用定期灭菌的介质来截留空气中的微生物而制得无菌压缩空气。 从可靠性，经济适用与便于控制等方面考虑，目前仍以介质过滤法较好，也是大多数发酵厂广泛采用的方法。 发酵生产中制备无菌空气的大致过程 3、空气预处理 1）外源空气的前过程 主要措施：提高空气吸气口的位置和加强吸入空气的前过滤。 2）空气压缩及压缩空气的冷却 空气经空压机压缩后，温度会显著上升，压缩比愈高，温度也愈高。 式中　T1、T2－压缩前后空气的热力学温度； 　　　p1、p2－压缩前后空气的绝对压力； 　　　k－绝热指数，空气为1.4。若压缩为多变过程，则可用多变指数m（对于空气m=1.2-1.3）代替绝热指数。 3）压缩空气冷却后的除水、除油、再加热和稳压（储气罐）。 前置高效过滤空气除菌流程 180M3发酵罐车间 大型空气压缩机 发酵车间的空气过滤器 4、空气过滤介质 1）纤维状或颗粒状过滤介质：棉花、玻璃纤维、活性炭等。 2）过滤纸类介质：主要是玻璃纤维纸。 3）石棉滤板：20%蓝石棉和80%纸浆纤维混合打浆制成。 4）烧结材料：烧结金属、烧结陶瓷、烧结塑料等。 5）微孔滤膜类过滤介质 6、提高过滤除菌效率的措施 1）减少进口空气的含菌数 2）设计和安装合理的空气过滤器，选用除菌效率高的过滤介质 3）设计合理的空气预处理设备，以达到除油、水和杂质的目的 4）降低进入空气过滤器的空气的相对湿度，保证过滤介质能在干燥状态下工作 5）稳定压缩空气的压力，采用合适容量的贮气罐 发酵用的无菌空气，是将自然界的空气经过压缩、冷却、除湿、过滤等过程，达到以下标准： （1）连续提供一定流量的压缩空气。 （2）空气的压强（表压）为0.2－0.4Mpa，过低则难于克服下游的阻力，过高则是浪费。 （3）进入过滤器前，空气的相对湿度小于70%。 （4）进入发酵罐的空气温度可比培养温度高10－30℃。 （5）压缩空气的洁净度，在设计空气过滤器时，一般以失败概率为10-3为指标。 2）空气带菌 从日本工业技术院分析空气带菌而造成的染菌为19.96％。国内外空气除菌技术虽已有较大改善，但仍然没有使染菌率降低到理想的程度。因为空气除菌系统较为复杂，环节多，偶遇不慎便会导致空气除菌失败。 3）设备渗漏 设备渗漏包括夹套穿孔、盘管穿孔、接种管穿孔、阀门渗漏、搅拌轴渗漏、罐盖漏和其它设备漏等。从日本工业技术院发酵研究所对染菌原因分析发现，这类染菌占33.85％。所以说加强设备本身及附属零部件的严密度检查，对制服染菌是极其主要的，也是重要的。 4）灭菌不彻底 灭菌技术的好坏与灭菌质量很有关系 升温快慢、保温时间,泡沫 蒸汽总压是否达到要求标准 环境中的杂菌数量因季节而有很大差别。如上海第四制药厂在卡那霉素生产中，于炎热的夏季将连续灭菌预热至800C的培养基采样培养，可发现无法计数的大量的芽孢杆菌；而在冬季取样的培养中，则仅发现2～3个芽孢杆菌。 原材料储存和保管，如液胨、玉米浆、母液糖等有机原料——杂菌的数量 发酵罐、培养基配制罐等设备的清洗质量——有无灭菌的死角对减少或避免染菌仍然是十分必要的。 五、发酵工业的无菌技术 1．化学试剂灭菌法： 常用试剂有甲醛、氯气（或次氯酸钠）、高锰酸钾、环氧乙烷、季铵盐（如新洁尔灭）、臭氧等。这些物质易与微生物细胞中的一些成分产生化学反应，如使蛋白质变性、酶类失活、破坏细胞膜通透性而杀灭微生物。 由于化学试剂也会与培养基中的一些成分作用，而且加入培养基后不易去除，它不能用于培养基的灭菌，但染菌后的培养基可用化学药剂处理。 2．辐射灭菌： 利用高能量的电磁辐射和微粒辐射来杀灭微生物。如紫外线（穿透力低，仅适用于表面消毒和空气消毒）与菌体核酸的光化学反应而使菌体死亡；（0.01-0.14nm）的X射线、Co60产生的γ射线，它们含极高的能量，可使菌体内的水和有机物产生强烈的离子化反应，形成OH-、H2O2和有机过氧化物，从而在微生物体内引起氧化连锁反应，导致微生物菌体迅速死亡。近年兴起了微波灭菌。 3．过滤除菌法 　　　适用于澄清液体和气体的除菌。是将液体或气体用微孔薄膜过滤，使大于孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌目的。用于遇热容易变性而失效的试