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第三章 从DNA到RNA---转录 表达系统三种物质的基本功能 DNA:贮存、传递 RNA:贮存、传递、酶 PRO:贮存、传递、酶 RNA 的转录 1 与RNA转录有关的概念 2 转录的基本过程 3 转录机器的主要成分和功能 RNA的转录:transcription 酶:转录是一种酶促的核苷酸聚合过程,所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶(DDRP) 编码链(有义链coding strand ):与mRNA序列相同的那条DNA链 反义链(无意义链,负链,antisense ):在RNA的转录中,用作模板的DNA链 增强子:Enhencer 启动子:Promoter 终止子:Terminator 转录单元: 转录区: 二、转录的基本过程 模板识别:RNA聚合酶与启动子DNA作用并与之结合。在DNA上形成转录泡。 通过启动子:转录起始后直到9个核苷酸短链 的形成。 转录延长: RNA聚合酶离开启动子,沿DNA链移动并产生新RNA链伸长。 终止:不再形成磷酸二酯键,RNA-DNA分离,转录泡瓦解,DNA恢复双链。 酶对启动子的识别是转录的第一步 大肠杆菌启动子:在转录开始位置的上游10个和35个核苷酸位置有两段DNA的序列比较保守,分别称为-10序列(-10 sequence)和-35序列(-35 sequence)。 全酶由5个亚基组成,去掉δ亚基的部分称为核心酶,核心酶本身就能催化苷酸间磷酸二酸键形成。利福平和利福霉素能结合在β亚基上而对此酶发生强烈的抑制作用。β亚基似乎是酶和核苷酸底物结合的部位。δ亚基的功能是辨认转录起始点的。β’亚基是酶与DNA模板结合的主要成分。α亚基可能与转录基因的类型和种类有关。 大肠杆菌RNA聚合酶 亚单位 分子量 亚单位数 组分 功 能 α 36512 2 核心酶 决定哪种基因被转录 核心酶组装 β 150618 1 核心酶 与转录全过程有关 形成活性中心 β 155613 1 核心酶 结合DNA模板 δ 70263 1 δ因子 识别不同的启动子 启动子选择:RNA聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭复合物 开放复合物形成: δ亚基与-10区紧密结合,确认转录起始点,DNA解链形成开放复合物 开放复合物与最初的两个NTP结合并在这两个核甘酸之间形成磷酸二酯键后转变成包括RNA聚合酶、DNA、新生RNA的三元复合物 8-14亚基 种类 分布 合成的RNA类型 对α-鹅膏蕈碱的敏感性 Ⅰ 核仁 rRNA 不敏感 Ⅱ 核质 hnRNA 低浓度敏感 Ⅲ 核质 tRNA,5sRNA 高浓度敏感 Mt 线粒体 单亚基,与T7类似 不敏感 Ct 叶绿体 多亚基,与细菌类似 不敏感 转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生:酶与启动子结合后,并在RNA聚合酶(?)的催化下使DNA的双链解离,形成转录泡,为RNA合成提供单链模板,并按碱基配对原则,结合核苷酸,在核苷酸之间形成磷酸二脂键(起始复合物)。 转录起始后直到形成9个核苷酸短链,是通过启动子阶段,此时RNA聚合酶一直处于启动子区,新生的RNA链与DNA链的结合不够牢固,很容易从DNA链上掉下来并导致转录重新开始。一旦RNA酶成功地合成9个以上核苷酸并离开启动子区,转录就进入正常的延伸阶段。所以,通过启动子的时间代表一个启动子的强弱。一般来说,通过启动子的时间越短,该基因转录起始的频率也越高。 当RNA链伸长到8~9个核酸后, δ亚基解离,起始完成,进入RNA的延伸阶段 . 转录的延长阶段,原核生物与真核生物之间没有太大差别。 4、转录的终止 不依赖于ρ因子的终止作用 依赖于ρ因子的终止作用 两类终止信号有共同的序列特征,在转录终止之前有一段回文结构,之间由几个碱基隔开. 不依赖ρ因子的终止序列中富含G·C碱基对,其下游6-8个A; 依赖ρ因子
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