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广州大学实验报告 学 院 土 木 学 院 专业、班级 06给水排水 班 学 号 姓 名 课 程 名 称 水处理微生物学 实 验 时 间 2008.12.1――2008.12.5 实验目录 实验一 显微镜的使用及微生物形态的观察实验----------------------------2 实验二 微型动物的计数实验--------------------------------------------5 实验三 细菌、霉菌、酵母菌、放线菌形态的观察实验----------------------6 实验四 微生物的染色实验----------------------------------------------7 实验五 培养基的制备及灭菌实验----------------------------------------9 实验六 微生物纯种分离、培养及接种技术-------------------------------12 实验七 纯培养菌种的菌体、菌落形态观察实验---------------------------14 实验八 微生物的生理生化特征实验-------------------------------------15 实验一 显微镜的使用及微生物形态的观察 一、实验目的 (1)学习普通光学显微镜的使用方法。 (2)结合天然污水的观察，认识原生动物、菌胶团等微生物形态，并学习测量微生物大小的方法。 二、实验用具 (1)生物滤池滤料、活性污泥法曝气池混合液。 (2)显微镜、目测微尺、物测微尺、载玻片、盖玻片等。 三、实验步骤 显微镜的结构和各部分的作用 微生物检验常用的显微镜见图3—1—1、3—1—2，其构造分机械和光学两部分 1．机械结构 熟悉显微镜的镜筒、载物台、调节器的各部分结构，并操作使用。 2．光学部分 （1）接目镜。显微镜具有3个接目镜，其上常刻有“5×”、“10×”或“16×”符号，即使用时可放大5倍、10倍或16倍。观察微生物时常用16倍的接目镜。 (2) 接物镜。接物镜装在回转板上，可分低倍镜、高倍镜和油镜3种，放大倍数分别是4、10、40、100。 (3) 聚光器。聚光器在载物台的下面，用来聚合由光源聚合器射来的光线。聚光器可以上下调整，中央装有光阑，用以调节显微镜照明系统的数值孔径，它直接影响分辨率、对比度和焦深。 （二）显微镜使用和保护的方法 1．操作步骤 (1）把电源开关按向“ON”一边，接通电源。 (2)把标本放在载物台上，把10×物镜转入工作位置，对标本调焦。调焦旋钮往外旋为升，往内旋为降。微调焦钮每一转使载物台升(降)0，3mm。此调焦钮上的刻度分为每小格2／an。粗调焦钮每一转使载物台升(降)3．6mm。转动调焦钮时用力要均匀、缓慢，避免碰坏标本片。 (3)将需用的物镜转入，再次对标本调焦。 (4)调节聚光器的升降位置，达到所需要的照明状态。一般情况下，孔径光阑的直径调至物镜光瞳的70％—80％时，能获得适当对比度的良好图像。 (5)调节亮度控制钮，改变输入电压以调正亮度。 (6)调节聚光器孔径光阑。 2．油镜的使用 使用100×油物镜时，必须在镜头与标本之间涂上香柏油，浸油不能存有气泡，不然将使像质劣化。检查镜渍油中是否有气泡时，将目镜从镜筒取下，在镜筒中的光瞳孔观察。要消除气泡，可将物镜转换器稍稍来回转动几次，再加些油，或者换掉油，注意不要把转换器转得过远，以免其他物镜端面也沾上了油。擦去油时，要用擦镜纸或软布片，沾上二甲苯在透镜下面轻擦数次。用过的纸或布，不能再接触擦净的透镜。 （三）活性污泥和生物膜的观察 观察活性污泥与生物膜的结构及菌胶团的形状、形态特征和运动方式等。 1.标本的制备 (1)、活性污泥。 ①取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放在洁净的载玻片的中央(如混合液中污泥较少，可待其沉淀后，取沉淀污泥一小滴加到载玻片上；如混合液中污泥较多，则应稀释后进行观察)。 ②小心地用洗净的盖玻片覆盖。这样，就制成了活性污泥的标本。注意：加盖玻片时应使其中央已接触到水滴后才放下，否则会在片内形成气泡，影响观察。 (2)、生物膜。 ①从生物膜法的构筑物内刮取生物膜一小块，用蒸馏水稀释，制成供显微镜观察用的菌液。对于用石子作滤料的生物滤池，也可取石子一小块，置于冲洗干净的烧杯中，加蒸馏水 少许和干净的玻璃珠，摇荡数分钟，使滤料上的生物膜脱落在水中，去掉滤料，再摇荡数分钟，做成菌液(如太浓、不易在显微镜下观察，可进行稀释)。