敬钊毒素--Ⅱ和钠通道1.5作用的分子机制分析.pdf

分类号 鱼墨 密级 学校代码 !Q墨垒2 学号 2Q】至Q2】垒】至2璺 敬钊毒素．II与钠通道1．5作用 的分子机制研究 Molecular mechanismofthetarantulatoxin with jingzhaotoxin—IIinteracting sodium channel Nav1．5 subtype 指导教师姓名、职称 型主坐塾撞 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一五年五月 万方数据 中文摘要 敬钊毒素．II(JZTX．II)是一种从敬钊缨毛蛛粗毒的毒液中分离 纯化而得到的由32个氨基酸组成分子量为3561．13Da的多肽毒素， 包含6个半胱氨酸形成3对二硫键，属于ICK模体结构。通过Edman CDNFSCQPAIKWCIWSP。 本实验室前期研究结果表明，JZTX．II对大鼠心肌细胞具有选择 性作用，延缓其河豚毒素不敏感(T1Ⅸ．R)钠通道的失活，对大鼠 DIⅪ神经元上的钠通道有微弱的影响，对大脑中的钠通道几乎没有 作用。然而，我们并不知道JZTX．II作用于哪个特定的钠通道亚型以 及其作用的分子机制。在四个所检测的电压敏感钠通道亚型中， 4-4 nM)，与rNavl．3 JZTX-II对hNavl．5的作用是最强的(EC50=125 相比作用要强10倍，毒素对rNavl．4和hNav．7有非常微弱的作用。 动力学相关实验结果显示，虽然JZTX．II抑制Navl．5电流失活，但 是对其稳态失活没有影响。O．5．州毒素处理使Navl．5最大峰电流的 mV，但是对通道的起始激活电压 激活电压朝超极化方向漂移了约10 更容易被激活，并且其不改变通道的离子选择性。此外，JZTX．II加 快了Navl．5通道从快失活状态恢复的速度，减少了通道失活的数量， 缩短了通道从失活状态到关闭状态的过渡期。实验结果还表明，毒素 T 万方数据 从toxin．Navl．5复合体上的解离是电压依赖性的，更强的去极化电压 处理能引发更快的解离。相比于解离曲线的电压依赖性，JZTX．II的 重新结合表现出非电压依赖性，不同的复极化电压对毒素重新结合的 动力学影响不明显。嵌合体实验分析表明，Navl．5第四个结构域 重要的作用。单点突变实验分析表明，一些位于Navl．5DIV的S1．S2 理，与alpha蝎毒素相类似，JZTX．II与神经毒素受体位点3相结合。 关键字：JZTX．II，失活，钠通道1．5，作用机制 II 万方数据 Abs仃act a32-residuetoxinisolatedfrom Jingzhaotoxin-II(JZTX—II)ispeptide Chinesetarantula venomwithamolecular Chilobrachysjingzhao