4-微生物与替代工艺和替代产品.ppt

* Candida bombicola 假丝酵母 cells producing crystalline sophorolipids槐糖脂 三、生物表面活性剂的合成 生物表面活性剂的生物合成途径多种多样，有从头合成疏水部分、亲水部分或者两者都合成。实际生产中，利用非从头合成。通过改良碳源如糖类、烷烃等来生产，各种不同碳源基质常常能被结合进生物表面活性剂，形成一属有关的分子。 以烃类为基质生产的生物表面活性剂是生物表面活性剂中的一大类，许多微生物都可以以烃类为单一碳源生长。酵母菌和真菌主要利用直链饱和烃，细菌则除了降解异构烃或环烷烃以外，还利用不饱和烃和芳香族化合物。 微生物降解烃类存在的主要问题是烃的憎水性。各种微生物以不同方式解决这一问题。细菌和酵母菌通过分泌离子型表面活性剂，使培养基中的烃基质乳化。另一些微生物则产生非离子表面活性剂。总之 在烃基质培养时，各种微生物都产生有利于烃基质被动扩散而进人细胞内的效应，这是通过由微生物产生的一大类物质起作用。这类物质也就是所谓的“生物表面活性剂” 。 Involvement of biosurfactant (rhamnolipid) produced by Pseudomonas sp in the uptake of hydrocarbons. 铁硫蛋白-NADH氧化还原酶 铁硫蛋白 单氧酶 直链饱和脂肪烃再有氧条件下能被某些微生物分解。分解的方式有末端氧化、亚末端氧化和两末端氧化三种方式，大多数的烃微生物利用末端氧化方式分解直链饱和脂防烃。 四、生物表面活性剂合成分子机制 Fig. 1.?Overview of the factors directly or indirectly involved in gene regulation of rhamnolipid production. Green lines indicate transcriptional/translational activation and red line repression. Dashed lines indicate enzymatic activity (substrate not shown). 1、生物表面活性剂生产中的代谢调节 生物表面活性剂合成前体的代谢途径有多种，在某种程度上取决于主要碳源的性质。从碳水化合物合成糖脂表面活性剂时，有关的微生物代谢主要是糖解和脂肪形成；当以烃类为基质时，主要是脂解和糖原异生。 微生物产生生物表面活性剂常常以烃类为基础，然而也能以碳水化合物为基质。 虽然生物表面活性剂分子由糖和类脂两部分构成，但在以碳水化合物为基质时，整个分子的合成速度受类脂的合成速度所控制。因此，影响碳水化合物基质中脂肪酸形成的因素同样也可能影响生物表面活性剂的合成。 图7-1 从从碳水化合物基质合成生物表面活性剂前体的中间代谢 A一磷酸果糖激酶 B一丙酮酸激酶 C一异柠檬酸脱氢酶 D——ATP／柠檬酸裂合酶和丙酮酸脱氢酶 A、B 、 C和D为关键酶 2. 烃代谢的控制机理 脂肪酸可以从烃，如正构烷烃合成得到。然后，脂肪酸基可以很方便地构成表面活性剂分子。但是，由于表面活性剂分子中还含有糖部分，它的合成必须经由糖异生途径，即通过β-氧化将脂肪酸氧化到乙酰一CoA，或将奇数碳脂肪酸氧化到丙酰一CoA 。这样，在异柠檬酸裂合酶的作用下，经过苹果酸、乙醛酸循环，烃类氧化得到的乙酰一CoA最终转化成草酰乙酸。它随后由磷酸烯醇式丙酮酸羧基激酶催化形成磷酸烯醇式丙酮酸。 图7-2 从烃基质合成生物表面活性剂前体的中间代谢· A一异柠檬酸裂合酶 B一苹果酸合成酶 C一磷酸烯酸式丙酮酸羧基激酶 D—1，6－二磷酸果糖酶 A、B 、C和D为关键酶 3. 生物表面活性剂合成的调节 生物表面活性剂的合成可通过油性物质的诱发作用、葡萄糖等物质的代谢抑制、限氮及限多价阳离于以及其他作用方法调节。此外，改变微生物生长速度常常会使生物表面活性剂过量生产。温度对生物表面活性剂合成也有调节作用。 目前研究最多的是烃和其他不溶于水的物质诱发微生物生产生物表面活性剂的调节方式。 据认为，烃的存在对生物表面活性剂的生成起诱导作用，且发现在生长培养基中添加烃时生长的细胞在形态学上有显著的差异。 烃的类型可能也很重要。例如不动杆菌生产的乳化剂对特定烃类有一定的专一性。 利用DNA技术控制生物表面活性剂生产进展很慢，目前用遗传工程生产生物表面活性剂的例子只有将乳糖利用基因在铜绿假单胞菌中的表达，使