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资助项目:浙江省科技厅公益技术研究项目泥鳅苗种产业化繁育关机技术的研究与示范2010C32033);浙江省科技厅公益技术研究项目2012C22059);湖州市水产养殖创新团队科研计划项目泥鳅仔鱼摄食习性研究与开口饵料开发(2010KC02-6);湖州市科技局新农村建设计划项目泥鳅规模化繁育技术的研究(2009YN01)。
作者简介:刘士力,男,1985博士研究生。E-mail:liushili1212@126.com。
收稿日期:201-06-25,修回日期:201-06-。β-肌动蛋白基因的cDNA全长克隆及表达分析
刘士力1,2,,1,练青平1,李倩1,胡廷尖1
(1.浙江省淡水水产研究所,湖州 313001;2.上海海洋大学,上海 201306;
3. 浙江省长兴县李家港镇农科站,湖州 313102)
摘要:β-actin 是actin 家族的一员,在维持细胞结构,细胞内运动,细胞分裂等细胞生理活动方面发挥着重要的作用。采用RT-PCR和RACE法,从大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)肌肉中分离和克隆大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因。大鳞副泥鳅β-肌动蛋白基因全长1 710bp,其中5 -UTR长73bp,3 -UTR长509bp,编码区长1 128bp,编码375个氨基酸。大鳞副泥鳅β-肌动蛋白与其它鱼类氨基酸的同源性大于98%,核苷酸同源性大于87%。系统进化分析表明,大鳞副泥鳅β-肌动蛋自在进化上高度保守。qRT-PCR结果表明,β-肌动蛋白基因在大鳞副泥鳅的肌肉、心、肝、脾、肠、胃、精巢和卵巢共8种组织中都有表达。
关键词:大鳞副泥鳅;RACE;β-肌动蛋白;cDNA
中图分类号: Q753 文献标识码: A 文章编号:
Cloning and Expression Analysis of β-actin Gene from Paramisgurnus dabryanus
LIU Shi-li1,2 WANG Yu-chen1,2 ZHANG De-hua3 ZHANG Yu-fei1 LIAN Qing-ping1 LI Qian1 HU Ting-jian1
(1. Zhejiang institute of freshwater fisheries, Huzhou , 313001;
2. Shanghai Ocean University, Shanghai 201306;
3. Agriculture Station of Lijiagang Village in Changxing County, Huzhou , 313102)
Abstract: β-actin is a member of the actin family of genes, which play important roles in maintaining cyto skeletal structure, cell motility, cell division, Intracellular movements and contractile processes. In this paper, a cDNA encoding β-actin is derived from the large-scale loach (Paramisgurnus dabryanus) muscle tissue using RT-PCR and RACE methods. The complete β-actin cDNA of large-scale loach was 1 710bp in length,containing an open reading frame of 1 12bp (encoding 375 amino acids),flanked by bp 5UTR and 509bp 3UTR.Sequence analysis indicated that the largescale loach β-actin exhibits more than 98%amino acid identity and 87%nucleotide identity with other fishes’ β-actin.Phylogenetic assay indicated that the β-actin gene large-scale loach is highly conserved during evolution. Results from quantitative real-time PCR (qRT-PCR) showed the β-actin
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