蛋白质工程--3蛋白质的修饰和表达.pptVIP

第三章 蛋白质的修饰和表达 第一节 蛋白质修饰的化学途径 第二节 蛋白质改造的分子生物学途径 第三节 重组蛋白质的表达 第一节 蛋白质的化学修饰 凡通过活性基团的引入或去除，而是蛋白质一级结构发生改变的过程 影响因素： 1) 蛋白质功能基的反应活性 基团之间的氢键和静电作用 基团之间的空间阻力 2) 修饰剂的反应活性 根据化学修饰剂与蛋白质之间反应的性质不同，修饰反应主要分为酰化反应、烷基化反应、氧化还原反应、芳香环取代反应等类型，对蛋白质的巯基、氨基和羧基等侧链基团进行修饰 蛋白质化学修饰的主要部位是蛋白质的侧链基团，通过选择性试剂或亲和标记试剂与蛋白质分子侧链上特定的功能基团发生化学反应而实现的 1）碘乙酸和碘乙酰胺 2）N-乙基马来酰亚胺：反应伴随光吸收的变化 1）三硝基苯磺酸：与赖氨酸残基的ε-氨基发生反应形成氨基磺酸复合物 二硫键的化学修饰 二硫键的还原：必须使用超剂量的巯基乙醇，同时用过羧甲基化处理 判断蛋白质分子中有无二