第二节基因工程的基本操作程序精品.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 （1）农杆菌转化法 ①特点: 能感染_______________________，对单子叶植物无感染能力；________________可转移至受体细胞并整合到其染色体上 双子叶植物和祼子植物 Ti质粒的T-DNA （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 （1）农杆菌转化法 ①特点: ②过程: 将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA上→表达 （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 （1）农杆菌转化法 （2）基因枪法 是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。 （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 （1）农杆菌转化法 （2）基因枪法 （3）花粉管通道法 是我国科学家独创的一种方法。我国的转基因抗虫棉就是用这种方法获得的。 （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 2.将目的基因导入动物细胞 ——显微注射技术 受体细胞类型： 受精卵 （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 2.将目的基因导入动物细胞 3.将目的基因导入微生物细胞 ①微生物作受体细胞的原因： 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少等 （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 2.将目的基因导入动物细胞 3.将目的基因导入微生物细胞 ①微生物作受体细胞的原因： ②常用菌及处理方法： 大肠杆菌 ——Ca2+处理 （一）转化： （二）方法： 1.将目的基因导入植物细胞 三、将目的基因导入受体细胞 2.将目的基因导入动物细胞 3.将目的基因导入微生物细胞 ①微生物作受体细胞的原因： ②常用菌及处理方法： ③过程： Ca2+处理大肠杆菌 感受态细胞 基因表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA （2012浙江卷）6．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是 A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 A （2014海南卷）31[生物—选修3：现代生物科技专题]（15分） 下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。 请据图回答： ⑴获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在 酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在 作用下合成双链DNA，从而获得所需基因； ⑵利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有 、 、4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。 ⑶由A和载体B拼接形成的C通常称为 。 ⑷在基因工程中，常用Ca2＋处理D，其目的是 。 逆转录 DNA聚合酶 引物 模板 基因表达载体 使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子 检测 ①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 方法: 基因探针： DNA分子杂交技术 放射性同位素标记的目的基因 15N 15N 探针 14N 14N 转基因生物的DNA 变性 变性 四、目的基因的检测与鉴定 检测 ①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 四、目的基因的检测与鉴定 ②检测目的基因是否转录出mRNA 方法： 分子杂交技术 15N 15N 探针 14N 14N 转基因生物的mRNA 变性 检测 ①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 四、目的基因的检测与鉴定 ②检测目的基因是否转录出mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法： 抗原-抗体杂交 鉴定——个体生物学水平的鉴定 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 （2014天津卷）4.为达到相应目的，必须通过分子检测的是 A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D.21三体综合征的诊断