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富油微藻的筛选其培养条件的优化研究.pdf
富油微藻的筛选及其培养条件的优化研究
摘要
随着全球工业的快速发展,人们对能源的需求也持续增长。然而,由于化
石能源的有限性,人们不得不寻找其他替代性能源。生物柴油是以生物体油脂
为原料,通过水解、酯化而得到的脂肪酸甲酯或乙酯,是一种可以替代普通化
石柴油的环保、可再生能源。
本研究从筛选富油微藻出发,从海水中筛选出1株小球藻和1株盒形藻两
种富油微藻,以∥2培养基为基础,分别探讨两种微藻在单一因素改变的条件下
微藻生长及油脂含量变化情况;并采用尼罗红(NileRed)荧光染色法对各环境因
子条件下小球藻细胞内油脂积累状况进行动态监测,进而确定其最优培养条件。
在pH值6.5~8.5的范围内,小球藻的生长及油脂含量变化不明显。在N03‘
浓度为3.0 mmol/L的培养
mmol/L时,小球藻生物量最高;在NO[浓度为0.6
mmol/L
条件下,小球藻油脂积累比其他条件更具优势。在M92+浓度为0.6~1.8
的范围内,对小球藻的生长影响较小。Fe”对小球藻的生长及油脂积累都有较
大的影响,高浓度的Fe”能促进小球藻的生长及油脂含量的积累。在一定范围
内,较高的zn2+浓度能够显著抑制小球藻的生长和油脂的积累,而低浓度(2.4
Janol/L)的Zn2+则促进小球藻的生长和体内油脂的积累。
mmol/L时,盒形藻体内油脂含量较高。N03。浓度为0.3
在NO[浓度为4.8
mmol/L时,盒形藻在培养的第12天油脂含量达到最高值。在pH值为8时,
盒形藻的生长达到最佳状态。pH值为6时,盒形藻体内的油脂积累达到最佳状
态。较高的Fe”浓度可以促进盒形藻的生长。在Fe3+浓度为0.01~100p.mol/L
的范围内,同一生长时期的盒形藻油脂含量相差不大。 mmol/L
M92+浓度为3.0
的条件下,盒形藻的生长状况最好。不同M92+浓度对盒形藻体内的油脂含量影
响较小。在Zn2+浓度为1.74Imaol/L的条件下,盒形藻的生长状况和油脂积累状
mmol/L的范围内,盒形藻的生长状况随着Si2+浓
况最佳。在Si2+浓度0~0.56
mmol/L的浓度梯度下的盒形
度的增加而变差。在培养的第11~13天,Si2+0.07
藻油脂积累达到最佳状态。
三个影响因子分别对小球藻和盒形藻产油条件进行优化。研究表明,小球藻的
mmol/L,Fe3+浓度为12
最优培养条件为:M92+浓度为0.9 I.tmol/L,Zn2+浓度为
7.2pmol/L,N03-浓度为O.3mmol/L,培养基初始pH值为8.5。盒形藻的最优
培养条件为:Si2+浓度为0.07 mmol/L,Fe3+浓度为100
mmol/L,M92+浓度为O.5
1.unol/L,zn2+浓度为1.74
panol/L,N03浓度为O.3mmol/L,培养基初始pH值
为9。
关键词:生物柴油;富油微藻;环境因子;尼罗红;正交试验
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