藻蓝蛋白组合生物合成和蓝藻连接多肽生物进化研究.pdf

对其结合色基的82位和153位半胱氨酸进行突变，进而构建了两组质粒分别为： 1 pCDF-cpcB(C 性色基裂合酶。此外，分析和比较了几种本实验室构建的重组藻胆蛋白及天然藻 胆蛋白的光谱学性质及差异。 以上获得的重组蛋白均采用金属螯合亲和层析的方法，建立起快速高效的纯 化工艺，对产物分别进行了SDS．PAGE、色素蛋白锌电泳、吸收和荧光光谱扫描 等检测。 4．首次对蓝藻连接多肽进行比较基因组学和系统进化分析。在25种蓝藻基 因组(20种测序已完成，5种正在进行)中，得到了共192条连接多肽基因序列， 包括167条与藻胆蛋白相关的连接多肽(Linker 了这192条序列的基因结构、基因组上的定汔、保守域和多态性，讨论了这些连 接多肽的特征与功能。根据连接多肽的系统进化特征将蓝藻连接多肽分成六类， 发现多数的连接多肽与藻胆蛋白聚集成簇，并多与藻胆蛋白的亚基、色基及相关 的催化酶共享一个启动子。蓝藻连接多肽的产生、分化和消失归因于蓝藻对不同 环境选择压力特别是光适应过程中产生的基因复制、水平基因转移或基因丢失。 ’本论文为光学活性藻蓝蛋白的合成、广泛应用以及人工藻胆体的合成奠定了 基础，探讨了藻胆蛋白的荧光活性机理，并通过对藻胆体连接多肽系统进化的研 究，加深了对蓝藻光系统功能和进化的认识。 关键词：蓝藻；藻蓝蛋白；连接多肽；荧光；组合生物合成；进化 ll ResearchonCombinat Bi i SofFI uorescent ional osynthes inand Iutionof iaI Evo Phycocyan Cyanobacter i l．somesLinkerPoI ides Phycob ypept Abstract the earthwiththe ale oldestlifeon of Cyanobacteria among capacityoxygenic a acrucial photosynthesis．Aslight—harvesting rolein the and of in transferring energyabsorbing photosynthesiscyanobacteria．PBSs are are ofvarious andlinker composed highlyorganizedcomplexes，and biliproteins seriesofresearchesonPBSshavebeendonesince have polypeptides．A tlley inthefieldsof and comprehensive food，medicine application becomes in a theresearchof