产纤维素酶高温线菌产酶特性研究及其多相分类.pdfVIP

摘要 从四川筒阳、都江堰、温江、大邑、夹江、彭州、蛾眉以及雅安、名山和四川农 业大学的教学科研园区采集堆肥样品，分离获得33株高温放线菌，筛选获得了一株 具有较好纤维素分解效果的菌株CN9，对其产酶条件进行了研究。采用多相分类技 术对高温放线菌代表菌株CN9和DYl9的分类地位进行了分析。研究结果如下： 1．用纤维素刚果红培养基对分离到的33株高温放线菌进行纤维素分解菌的初 筛，得到5株有较好分解效果的菌株；用赫奇逊培养基做滤纸失重实验对初筛所得5 株菌株进行复筛，菌株CN9对滤纸分解效果最好。 2．对CN9进行了液体发酵培养和固态发酵培养以测定其滤纸酶、cl酶、cx酶。 发酵滤纸酶活力为3．25U／g,Cl酶为0．06u／g，CMC酶为14．6U／g。以液体发酵CMCase对 菌株CN9产酶的条件作了研究，结果表明最佳碳源为麸皮，最佳氮源为大豆粉，Ca2+ 对产酶有促进作用。最适培养条件为45℃，250r／min，培养120h。并以麸皮、大豆粉、 3．CN9的多相分类结果表明：CN9菌株的基内菌丝丰富、不断裂，有直链分生 孢子：在供试的八种培养基中，气生菌丝呈白色或黄色，无可溶性色素产生；CN9 生长温度范围较宽，可在28℃．65℃的温度范围生长，55℃生长最好；该菌能耐3％ 的NaCl；最适生长口H为7．10：除了D．核糖，不能利用其它供试碳源；氮源利用良 好；化学分类表明，CN9细胞壁含有L，L-DAP，属胞壁I型，无特征性糖，属糖型 c型：用16SrDNA部分序列构建的系统发育进化树，CN9与高温链霉菌位于同一分 支，初步认为CN9属于高温链霉菌。 4．高温放线菌DYl9多相分类结果表明：DYl9的基内菌丝细长，基内菌丝上着 生单个孢子，气生菌丝呈螺旋或半螺旋状的短孢子链；在8种供试培养基中，气生菌 丝呈白色或黄色；在不同的培养基上。基内菌丝颜色较多，以淡黄色为主，无可溶性 长pH为8．10；除了D．核糖，不能利用其它碳源，对氮源有较好的利用效果；细胞壁含 rDNA部分序列构建的 有meso．DAP，属胞壁Ⅲ型，无特征性糖，属糖型c型；用16S 系统发育进化树，与链孢子囊菌科一个种和热多孢菌属一个种的菌株位于同一系统发 育分支，初步认为菌株DYl9在分类上属于链孢子囊菌科热多孢菌属。 关键词：高温放线菌纤维素酶产酶条件多相分类 ABS’I’RACT strainsWeleisolatedfromthestraw Thi啊-threethermoactinomyces compost collectedfrom in the Sichuan farmofSichuan University． Mingshan province，andUniversity Agricultural A CMCase strain，namedscreened．The goodcellulose-decompsingCN9，Was producing conditionwas the of CN9and studied．Atsam_e strains time，the polymorphictaxonomy DYl9 were resultswere： performed．The ofthesize